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文檔簡介
1、目的:研究二烯丙基二硫(DADS)對大鼠肝星狀細胞(HSC-T6)增殖及細胞外基質(zhì)分泌的影響,并探討是否通過上調(diào)RORa而抑制Wnt/β-catenin信號通路從而抑制肝纖維化。
方法:以HSC-T6為研究對象,分別用不同的濃度的(10、20、40、80 mg/L)DADS處理HSC-T6細胞不同時間后,用MTT法分析DADS對HSC-T6細胞的增殖抑制作用,得出最適濃度范圍及最佳時間。用酶聯(lián)免疫法(Elisa)測定肝纖維化指
2、標Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、層粘連蛋白(LN)的表達。采用 RT-PCR法觀察細胞β-catenin、cyclin D1mRNA的表達。Western Blot法測定β-catenin、cyclin D1、RORα蛋白的表達。
結果:MTT結果提示DADS抑制大鼠肝星狀細胞(HSC-T6)增殖,呈時間-劑量關系。從整體上來看,相對藥物作用48 h后效果最好,其IC50為42.06 mg/L,酶聯(lián)免疫法結果提示DADS能抑制PCⅢ、
3、LN蛋白的分泌(P<0.05), RT-PCR結果提示能下調(diào)β-catenin,cyclin D1mRNA的表達(P<0.05), Western Blot法結果提示能下調(diào)β-catenin,cyclin D1蛋白的表達以及上調(diào)RORα蛋白的表達(P<0.05)。
結論:在本實驗條件下,DADS對大鼠肝星狀細胞的增殖及細胞外基質(zhì)分泌有抑制作用,其機制可能是通過上調(diào)RORα抑制大鼠肝星狀細胞(HSC-T6) Wnt/β-cate
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