MaWRKY26與MaVQ5蛋白互作調(diào)控MeJA誘導(dǎo)香蕉果實耐冷性的機制.pdf

1、香蕉在低溫貯運低于13℃時易發(fā)生冷害。因此，研究香蕉果實采后冷害以及耐冷性機制對提高其商品價值具有重要意義。WRKY是一類植物特有的轉(zhuǎn)錄因子，在植物生長發(fā)育、激素調(diào)節(jié)和逆境響應(yīng)等方面發(fā)揮重要作用。茉莉酸（JA）在植物的生長發(fā)育和脅迫響應(yīng)中也具有重要的作用。然而，JA轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制還不清楚。本文的研究目的在于闡明香蕉果實MaWRKY26轉(zhuǎn)錄因子在調(diào)控JA合成中的作用以及與茉莉酸甲酯（MeJA）誘導(dǎo)耐冷性的關(guān)系。
　　本文在獲得香蕉果實

2、MaWRKY26基因全長序列的基礎(chǔ)上，分析MaWRKY26基因的特性以及對冷脅迫和 MeJA的響應(yīng)，MaWRKY26調(diào)控 JA合成相關(guān)基因的表達，MaWRKY26與MaVQ蛋白的互作及互作后對調(diào)控JA合成相關(guān)基因的影響，期望闡明MaWRKY26響應(yīng)冷脅迫和調(diào)控MeJA誘導(dǎo)耐冷性的分子機制。主要研究結(jié)果如下：
　　1.實時熒光定量分析表明，冷脅迫誘導(dǎo)了MaWRKY26的表達，外源MeJA處理對MaWRKY26的誘導(dǎo)表達更強，說明Ma

3、WRKY26響應(yīng)冷脅迫，并且可能與MeJA誘導(dǎo)的耐冷性有一定關(guān)系。
　　2.克隆了MaWRKY26基因全長的cDNA序列。氨基酸序列和進化樹分析表明，MaWRKY26含有兩個WRKY結(jié)構(gòu)域，屬于WRKY家族的第I類。亞細胞定位顯示，MaWRKY26定位于細胞核，為核蛋白。轉(zhuǎn)錄活性分析表明MaWRKY26具有轉(zhuǎn)錄激活活性，是一個轉(zhuǎn)錄激活子。
　　3．凝膠阻滯分析（EMSA）和雙熒光素酶報告基因?qū)嶒烇@示，MaWRKY26能夠結(jié)合

4、JA生物合成基因MaLOX2、MaAOS3和MaOPR3的啟動子，并激活其活性。
　　4.酵母雙雜交（Y2H）、雙分子熒光互補（BiFC）和免疫共沉淀（Co-IP）實驗分析證實 MaVQ5蛋白能與 MaWRKY26互作，進一步分析顯示 MaVQ5減弱了MaWRKY26激活MaLOX2、MaAOS3和MaOPR3啟動子的能力。
　　上述結(jié)果表明，MaWRKY26通過直接調(diào)控JA合成基因來參與調(diào)控香蕉果實對冷脅迫和MeJA誘導(dǎo)的