SENP5基因在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及功能.pdf

1、目的：研究SENP5基因在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)特點(diǎn)及臨床意義。在此基礎(chǔ)上，探討SENP5表達(dá)增加對(duì)口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞增殖、凋亡、細(xì)胞周期、體外侵襲能力的影響。并進(jìn)一步研究SENP5表達(dá)與口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞分化的關(guān)系，并探討其分子機(jī)制。 方法： 1、首先用免疫組化檢測(cè)48例口腔鱗狀細(xì)胞癌組織以及癌旁組織中SENP5的表達(dá)，并將SENP5的表達(dá)情況與臨床病理指標(biāo)間的相關(guān)性進(jìn)行檢測(cè)，了解SENP5表達(dá)的臨床意義。 2

2、、分別采用甲基噻唑基四唑鹽比色技術(shù)和平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)表達(dá)SENP5對(duì)Tca8113細(xì)胞增殖的影響；采用流式細(xì)胞儀的PI染色法、Annexin-V+PI染色法分別檢測(cè)過(guò)表達(dá)SENP5對(duì)Tca8113細(xì)胞周期和凋亡的影響；通過(guò)Transwell小室實(shí)驗(yàn)，觀察過(guò)表達(dá)SENP5對(duì)Tca8113細(xì)胞體外遷移能力和侵襲能力的影響。 3、鈣誘導(dǎo)正常口腔粘膜上皮細(xì)胞和Tca8113細(xì)胞分化，觀察其過(guò)程中兩種細(xì)胞SENP5表達(dá)變化的不同。并

3、通過(guò)表達(dá)熒光蛋白標(biāo)記的SENP5，觀察鈣誘導(dǎo)分化過(guò)程中Tca8113細(xì)胞SENP5蛋白胞內(nèi)定位的改變。通過(guò)過(guò)表達(dá)SENP5，檢測(cè)SENP5表達(dá)增加對(duì)Tca8113細(xì)胞分化的影響。 4、采用PKCα特異的siRNA下調(diào)Tca8113細(xì)胞中PKCα的表達(dá)，檢測(cè)PKCα表達(dá)變化對(duì)Tca8113細(xì)胞分化的影響，同時(shí)探討PKCα通路對(duì)SENP5表達(dá)的影響。 結(jié)果： 1、SENP5在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)高于癌旁上皮，其

4、表達(dá)強(qiáng)度與口腔鱗狀細(xì)胞癌的分化程度相關(guān)，與預(yù)后等其它臨床和病理指標(biāo)不相關(guān)；SENP5在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中主要定位于胞漿，在癌旁上皮中主要定位于胞核。 2、SENP5的高表達(dá)會(huì)抑制人口腔鱗癌細(xì)胞系Tca8113細(xì)胞的增殖能力；會(huì)使Tca8113細(xì)胞產(chǎn)生G0/G1期阻滯；會(huì)抑制Tca8113細(xì)胞的體外遷移能力和侵襲能力。 3、鈣誘導(dǎo)分化可以使正?？谇徽衬ど掀ぜ?xì)胞中SENP5表達(dá)增加，SENP5蛋白定位于核內(nèi)；鈣誘導(dǎo)分化也可

5、以使Tca8113細(xì)胞中SENP5表達(dá)增加，在鈣誘導(dǎo)作用下，Tca8113細(xì)胞中SENP5可移位至胞漿中；Tca8113細(xì)胞中SENP5的表達(dá)增加，可以誘導(dǎo)Tca8113細(xì)胞分化。 4、鈣誘導(dǎo)正?？谇徽衬ど掀ぜ?xì)胞和Tca8113細(xì)胞分化過(guò)程中，PKCα，會(huì)有表達(dá)下降；PKCα的表達(dá)下調(diào)，可導(dǎo)致Tca8113細(xì)胞的分化程度的增加，同時(shí)使鈣誘導(dǎo)Tca8113細(xì)胞分化的效應(yīng)增加；在Tca8113細(xì)胞中，SENP5的表達(dá)與PKCα的表達(dá)

6、改變無(wú)關(guān)。 結(jié)論： SENP5與口腔鱗狀細(xì)胞癌的分化程度明顯相關(guān)。過(guò)表達(dá)SENP5可明顯的促進(jìn)口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞分化，除了使腫瘤細(xì)胞分化指標(biāo)表達(dá)增加，還可使腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制，侵襲能力下降。與正?？谇徽衬ど掀ぜ?xì)胞中SENP5定位于胞核不同，在口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞中，SENP5可表達(dá)于胞漿，而在鈣誘導(dǎo)分化的過(guò)程中，SENP5有進(jìn)一步向胞漿移位的趨勢(shì)。鈣誘導(dǎo)分化可以使SENP5表達(dá)增加，但SENP5的表達(dá)增加與PKCα通路沒(méi)有