不同形態(tài)鐵在肉仔雞小腸中的吸收特點(diǎn)及其機(jī)制研究.pdf

1、本論文研究共設(shè)2個(gè)試驗(yàn)，采用體內(nèi)原位結(jié)扎灌注腸段法和自然飼喂法，研究不同絡(luò)（螯）合強(qiáng)度有機(jī)鐵和無(wú)機(jī)硫酸亞鐵在肉仔雞小腸中的吸收特點(diǎn)及其機(jī)制。
　　試驗(yàn)一采用原位結(jié)扎灌注腸段法研究不同形態(tài)鐵在肉仔雞小腸中的吸收特點(diǎn)。本試驗(yàn)又分為兩個(gè)小試驗(yàn)：試驗(yàn)1和試驗(yàn)2。試驗(yàn)1采用單因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，共設(shè)8個(gè)處理組，分別為不加鐵的空白對(duì)照組以及分別添加無(wú)機(jī)硫酸亞鐵、甘氨酸鐵、硫酸亞鐵與甘氨酸混合物、硫酸亞鐵與蛋氨酸混合物、弱絡(luò)合強(qiáng)度（Qf=1.37

2、）蛋氨酸鐵（Fe-Met W）、中等絡(luò)合強(qiáng)度（Qf=43.6）蛋白鐵（Fe-Pro M）和極強(qiáng)螯合強(qiáng)度（Qf=8.59×103）蛋白鐵（Fe-Pro ES）的處理組，添加鐵組的鐵灌注濃度為0.45 mmol/L，灌注時(shí)間30min。試驗(yàn)2采用4×6+1雙因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，共設(shè)25個(gè)處理組，4種鐵源分別為無(wú)機(jī)硫酸亞鐵、Fe-Met W、Fe-Pro M和Fe-Pro ES，6個(gè)鐵添加水平分別為6.25μg/ml(0.11mM）、12.5μ

3、g/ml(0.22 mM)、25μg/ml(0.45 mM)、50μg/ml(0.9 mM)、100μg/ml(1.79 mM)和200μg/ml(3.58 mM)，同時(shí)設(shè)置不加鐵的空白對(duì)照組，灌注時(shí)間30min。試驗(yàn)1結(jié)果表明：在十二指腸中無(wú)論是有機(jī)鐵還是無(wú)機(jī)鐵的鐵吸收均顯著高于空腸和回腸中的鐵吸收，是后者的1.35-2.8倍；不同處理組肉仔雞在小腸各段的鐵吸收均無(wú)顯著差異。試驗(yàn)2結(jié)果表明：（1）灌注濃度為3.58mM時(shí)，中等絡(luò)合強(qiáng)度

4、鐵（Fe-Pro M）和極強(qiáng)螯合強(qiáng)度鐵（Fe-Pro ES）在肉仔雞十二指腸中的吸收速率顯著高于弱絡(luò)合強(qiáng)度鐵（Fe-Pro W）和無(wú)機(jī)硫酸亞鐵；（2）對(duì)不同形態(tài)鐵吸收速率隨其鐵添加水平的變化趨勢(shì)進(jìn)行擬合，發(fā)現(xiàn)不同鐵源在肉仔雞十二指腸中的吸收動(dòng)力學(xué)模型均為飽和載體吸收；（3）對(duì)吸收動(dòng)力學(xué)模型的參數(shù)進(jìn)行比較，中等絡(luò)合強(qiáng)度有機(jī)鐵（Fe-Pro M）和極強(qiáng)螯合強(qiáng)度有機(jī)鐵（Fe-Pro ES）的Jmax和Km均顯著高于弱絡(luò)合強(qiáng)度有機(jī)鐵（Fe-Pr

5、o W）和無(wú)機(jī)硫酸亞鐵。結(jié)果表明，肉仔雞小腸吸收鐵的主要腸段是十二指腸，不同鐵源在肉仔雞十二指腸中的吸收動(dòng)力學(xué)模型均以飽和載體吸收為主；在小腸灌注鐵濃度較高時(shí)，中等和極強(qiáng)絡(luò)（螯）合強(qiáng)度有機(jī)鐵的鐵吸收顯著高于弱絡(luò)合強(qiáng)度有機(jī)鐵和無(wú)機(jī)硫酸亞鐵；將蛋氨酸或甘氨酸與硫酸亞鐵簡(jiǎn)單混合不能改善小腸鐵的吸收。
　　試驗(yàn)二采用自然飼喂法研究了不同形態(tài)鐵對(duì)肉仔雞肝門靜脈血漿鐵含量及其小腸中鐵轉(zhuǎn)運(yùn)載體DMT1和FPN1基因表達(dá)的影響，探討不同形態(tài)鐵的吸

6、收差異及其機(jī)制。600只1日齡商品代Arbor Acres（AA）肉公雛于1-7日齡統(tǒng)一飼喂鐵缺乏的葡萄糖-酪蛋白純合飼糧（實(shí)測(cè)鐵含量為3.26mg/kg），使肉仔雞處于臨界缺鐵狀態(tài)。于8日齡時(shí)，按平均體重從中選取480只雞，隨機(jī)分成5個(gè)處理組，每個(gè)處理組8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12只雞，分別飼喂對(duì)照組（不添加鐵水平，實(shí)測(cè)鐵含量為69.86 mg/kg）和添加60 mg/kg鐵分別源于無(wú)機(jī)硫酸亞鐵、Fe-Met W、Fe-Pro M和Fe-P

7、ro ES的飼糧，試驗(yàn)期14天。試驗(yàn)結(jié)果表明：(1)在試驗(yàn)的第7天(14日齡)，肝門靜脈血漿鐵含量各處理組之間沒有顯著差異。在試驗(yàn)的第14天（21日齡），添加鐵組的肝門靜脈血漿鐵含量顯著高于對(duì)照組，且中等絡(luò)合強(qiáng)度有機(jī)鐵組的肝門靜脈血漿鐵含量和極強(qiáng)螯合強(qiáng)度有機(jī)鐵組差異不顯著，但是均顯著高于弱絡(luò)合強(qiáng)度有機(jī)鐵組和無(wú)機(jī)硫酸亞鐵組。（2）十二指腸中二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（DMT1）和膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（FPN1）的 mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著高于空腸和

8、回腸；與不添加鐵的對(duì)照組相比，飼糧添加鐵均顯著降低肉仔雞十二指腸的DMT1和FPN1 mRNA表達(dá)水平，而添加不同鐵源組之間的小腸各段的DMT1和FPN1 mRNA和蛋白表達(dá)水平差異不顯著。以上結(jié)果表明：十二指腸是肉仔雞小腸DMT1和FPN1基因表達(dá)的主要部位，可能是試驗(yàn)一獲得的十二指腸是肉雞小腸鐵吸收主要部位及其鐵吸收主要是載體轉(zhuǎn)運(yùn)方式的重要原因；肉雞小腸對(duì)中等絡(luò)合強(qiáng)度有機(jī)鐵和極強(qiáng)螯合強(qiáng)度有機(jī)鐵的吸收顯著高于弱絡(luò)合強(qiáng)度有機(jī)鐵和無(wú)機(jī)硫酸

9、亞鐵，鐵轉(zhuǎn)運(yùn)載體DMT1和FPN1可能參與調(diào)節(jié)鐵的吸收。
　　綜上所述，肉仔雞小腸鐵吸收的主要部位是十二指腸；不同鐵源在肉仔雞十二指腸中的吸收方式主要為飽和載體吸收方式；十二指腸是肉仔雞小腸DMT1和FPN1基因表達(dá)的主要部位，可能是十二指腸是肉雞小腸鐵吸收主要部位及其鐵吸收主要是載體轉(zhuǎn)運(yùn)方式的重要原因；中等絡(luò)合強(qiáng)度有機(jī)鐵和極強(qiáng)螯合強(qiáng)度有機(jī)鐵在肉雞小腸中的吸收顯著高于弱絡(luò)合強(qiáng)度有機(jī)鐵和無(wú)機(jī)硫酸亞鐵，鐵轉(zhuǎn)運(yùn)載體DMT1和FPN1可能