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1、為改進(jìn)羅漢果組織培養(yǎng)技術(shù),以青皮果品種為材料,對(duì)采自不同地方外植體的滅菌效果、不同光照條件對(duì)外植體直接分化再生苗能力的影響、不同外植體直接分化再生苗能力的差異,以及不同植物激素在羅漢果組織培養(yǎng)中生物效應(yīng)的差異等作了對(duì)比研究。結(jié)果如下: (1)從近距離網(wǎng)室采集外植體,比從遠(yuǎn)距離大田采集外植體更易獲得無菌苗。本課題組通過化學(xué)調(diào)控技術(shù),使羅漢果在廣西南寧市開 花結(jié)果,使就地采集外植體成為可能,這有利于實(shí)現(xiàn)在南寧短期內(nèi)獲得大量羅漢
2、果無菌苗; (2) 高顯色性暖色光827[#](顯色性Ra≥180,光通量3350 Lm,光強(qiáng)1200~1500Lx)可誘導(dǎo)培養(yǎng)在MS+BA2.0mg/L+IAA0.1me/L組培 養(yǎng)基上的葉片外植體直接分化再生苗,而白光(光通量2500 Lm,光強(qiáng)1550~2000Lx)則沒有此功能; (3) 在高顯色性暖色光下,葉片比葉柄和無芽莖段更易誘導(dǎo)再生苗,特別是葉片基部直接分化再生苗的能力最強(qiáng)。在誘導(dǎo)葉片外植體直接分化
3、再生苗時(shí),于MS中添加適當(dāng)?shù)耐庠粗参锛に厥潜仨毜?。BA濃度的高低直接影響再生苗的數(shù)量和質(zhì)量,以1.0~2.0mg/L為宜。在本試驗(yàn)條件下,BA(1.0~2.0 mg/L)與IAA(0.1mg/L)或IBA(0.1mg/L)的各種組合,能有效避免由愈傷組織分化成苗易引發(fā)劣質(zhì)變異的缺點(diǎn),這有可能使葉片成為羅漢果組培苗生產(chǎn)中除芽之外的新的外植體;(4)無菌苗的代齡對(duì)其葉片直接分化再生苗的能力有顯著影響。從第7代起,葉片直接分化能力急劇下降,到
4、12代時(shí).已完全喪失這種能力。因此在生產(chǎn)上應(yīng)杜絕使用代數(shù)過高的組培苗葉片作為外植體; (5)與BA(0.2mg/L)、KT(0.2 mg/L) 和CPPU(0.03mg/L)相 比,LFS(0.2mg/L)可以促進(jìn)原始外植體腋芽迅速萌動(dòng)生長(zhǎng),成苗率可達(dá)90%以上:而在繼代培養(yǎng)中,能直接誘導(dǎo)不定根的發(fā)生,無 需添加任何生長(zhǎng)素。且在外植體啟動(dòng)和繼代苗增殖兩個(gè)重要環(huán)節(jié)都顯著抑制愈傷組織的發(fā)生與生長(zhǎng),這對(duì)穩(wěn)定組培苗的遺傳性狀具有
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