生地降糖顆粒的工藝學(xué)研究.pdf

1、本文研究實(shí)驗(yàn)?zāi)康模翰捎谜辉O(shè)計(jì)法優(yōu)選生地降糖顆粒的合煎與分煎的提取工藝，以地黃中的梓醇、牛膝中的齊墩果酸和出膏率作為參考指標(biāo)；結(jié)合藥效學(xué)評(píng)價(jià)以確立制備工藝；研究生地降糖顆粒的毒性、降血糖作用及其機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)方法一、生地降糖顆粒提取工藝的篩選。 1、篩選合煎工藝：以梓醇的含量和出膏率為指標(biāo)，分別考察其與料液比、提取時(shí)間、提取次數(shù)的關(guān)系，優(yōu)選合煎正交工藝。 2、篩選分煎工藝：地黃和牛膝分別進(jìn)行正交工藝優(yōu)選，分別得出地

2、黃和牛膝的正交優(yōu)選工藝，考察二者與溶媒、提取時(shí)間、提取次數(shù)、料液比、粒度的關(guān)系。 3、工藝-藥效學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)：分為合煎、合煎醇沉(35％、55％、75％)、分煎、沉淀物和對(duì)照等組，觀察各組的降血糖作用，確定合理的生地降糖顆粒提取工藝。 實(shí)驗(yàn)方法二、生地降糖顆粒的急性毒性試驗(yàn)。 生地降糖顆粒樣品小鼠急性毒性試驗(yàn)，在無(wú)法觀測(cè)到半數(shù)致死量(LD50)的情況下，改測(cè)其最大耐受量(MTD)。 實(shí)驗(yàn)方法三、復(fù)制糖尿病模

3、型的劑量篩選采用四氧嘧啶(Alloxan，ALX)5個(gè)劑量組(40、50、60、70、80mg/kg)造模，進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，優(yōu)選合適的四氧嘧啶造模劑量。 實(shí)驗(yàn)方法四、生地降糖顆粒對(duì)DM小鼠的藥效學(xué)研究首先按照最大耐受量的1/10倍量作為預(yù)試驗(yàn)的中劑量組，再分別擴(kuò)大、縮小3倍作為大劑量組和小劑量組，進(jìn)行ALX誘導(dǎo)的DM小鼠降血糖作用預(yù)試驗(yàn)。篩選出合適的給藥劑量后，進(jìn)行藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。取昆明種小鼠150只，雌雄各半，從中隨機(jī)留取10只作

4、為正常對(duì)照組，雌雄各半。剩余昆明種小鼠尾靜脈給予0.6％ALX(60mg·kg-1)造模后，篩選血糖值≥11.0mmol/L為造模成功的DM小鼠，隨機(jī)分為模型組、生地降糖顆粒大、中、小劑量組，中藥陽(yáng)性藥對(duì)照組、西藥陽(yáng)性對(duì)照組。模型組ig10mL/kg蒸餾水，各給藥組均ig10mL/kg藥液。分別在第7d、14d、21d給藥后4h眼眶后靜脈叢采血，第21d摘取胰腺。檢測(cè)血糖、總膽固醇、甘油三酯后進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果一、生地降

5、糖顆粒的提取工藝生地和牛膝飲片以處方比例(生地：牛膝=2∶1)混合加10倍量水提取2h，提取3次后合并濾液濃縮至相對(duì)密度為1.15左右，加無(wú)水乙醇至濃度為75％，充分?jǐn)嚢桁o置4～6h，取上清液減壓濃縮至最大比重，減壓干燥得到干膏。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果二、生地降糖顆粒的小鼠MTD30k/kg(相當(dāng)于原生藥100g/kg)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果三、復(fù)制DM模型ALX尾靜脈注射后3d，各組動(dòng)物出現(xiàn)多飲、多食、多尿、身體消瘦等體征。血糖t-檢驗(yàn)結(jié)果

6、顯示60mg/kg組造模即能得到成功的DM小鼠模型。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果四、生地降糖顆粒的DM小鼠的藥效學(xué)研究。 1、對(duì)血糖的影響：各造模組與正常組小鼠比較血糖值均顯著升高(P＜0.01)，說(shuō)明模型穩(wěn)定可靠。給藥后第7d生地降糖顆粒大、中劑量組和格列本脲組與模型組比較血糖明顯下降(P＜0.05)。第14d生地降糖顆粒大、中、小劑量組和糖脈康顆粒組及格列本脲組血糖值均降低，與模型組比較，具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其中大、中

7、劑量組和格列本脲組有顯著的降血糖作用(P＜0.01)。給藥后第21d生地降糖顆粒大、中、小劑量組和格列本脲組血糖值均降低，與模型組比較具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。 2、對(duì)體質(zhì)量的影響：生地降糖顆粒大、中、小劑量組和糖脈康顆粒組對(duì)動(dòng)物體質(zhì)量的影響與模型組比較有明顯差異(P＜0.05)。 3、對(duì)血脂的影響：造模后21d甘油三酯已有明顯升高(P＜0.01)，但總膽固醇升高不明顯，生地降糖顆粒大劑量組能明顯降低甘油三酯