早期母子隔離應(yīng)激對幼鼠癲癇易感性的影響及其機制的研究.pdf

1、第一部分母子隔離應(yīng)激對幼鼠癲癇易感性的影響
　　 目的：探討早期母子隔離應(yīng)激對幼鼠氯化鋰-皮羅卡品和杏仁核點燃刺激誘導(dǎo)癲癇模型易感性的影響。
　　 方法：66新生SD大鼠幼鼠（孕鼠由重慶醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心提供）用于實驗，隨機分成3組：正常對照組（n=22），母子隔離15分鐘組（幼鼠出生當天計為PO，生后2天開始至生后15/17天，采用母子隔離方法，每天同一時間把幼鼠單獨置于安靜、保暖環(huán)境15分鐘，每次隔離結(jié)束后把幼鼠放

2、回籠中，n=22）、母子隔離3h組（隔離方法同前、每天隔離3小時，n=22）。在生后16/18天三組幼鼠分別行氯化鋰-皮羅卡品/杏仁核刺激誘導(dǎo)的驚厥實驗。
　　 結(jié)果：與正常組比較，P2-P15/17每天母子隔離3小時應(yīng)激組，氯化鋰-皮羅卡品誘導(dǎo)驚厥發(fā)作的潛伏期明顯縮短（p<0.05）；杏仁核點燃驚厥閾值降低、完全點燃所需刺激次數(shù)減少、驚厥發(fā)作程度顯著加重（p<0.05），而P2-P15/17每天母子隔離15分鐘應(yīng)激組與正常組幼

3、鼠在以上幾個方面比較則無顯著性差異（p>0.05）。
　　 結(jié)論：早期母子隔離3小時的應(yīng)激可通過縮短氯化鋰--皮羅卡品誘導(dǎo)驚厥發(fā)作的潛伏期、降低杏仁核點燃驚厥閾值、減少完全點燃所需的刺激次數(shù)，導(dǎo)致幼鼠兩種癲癇模型易感性增加。
　　 第二部分母子隔離應(yīng)激對海馬GABAα1表達及CA1區(qū)椎體神經(jīng)元興奮性的影響
　　 目的：初步探索早期母子隔離應(yīng)激增加幼鼠癲癇易感性的機制。
　　 方法：30只新生SD大鼠幼鼠用

4、于實驗，隨機分成3組，正常對照組（n=10），母子隔離15分鐘組（幼鼠出生當天計為PO，生后2天開始至生后15天，采用母子隔離方法，每天同一時間把幼鼠單獨置于安靜、保暖環(huán)境15分鐘，每次隔離結(jié)束把幼鼠放回籠中，n=10）、母子隔離3h組（隔離方法同前、每天隔離3小時，n=10）。P16天，4％多聚甲醛加生理鹽水灌注取腦，用免疫組組織化化染色方法檢測各組幼鼠海馬各區(qū)（主要是：CA1、CA3和齒狀回）GABAA受體α1亞單位的表達情況。制作

5、海馬腦片，全細胞膜片鉗檢測三組海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元自發(fā)性放電的特征。
　　 結(jié)果：正常對照組GABAA受體α1亞單位表達主要集中在海馬的CA1區(qū)、CA3區(qū)、齒狀回。母子隔離15min組GABAA受體α1亞單位免疫化學(xué)累積光密度在以上三個區(qū)域與對照組比較無顯著性差異（p>0.05），母子隔離3h組在海馬CA1區(qū)GABAA受體α1亞單位免疫化學(xué)累積光密度較對照組明顯降低（p<0.01），而在海馬CA3、齒狀回GABAA受體α1亞單

6、位免疫化學(xué)累積光密度較正常組無統(tǒng)計學(xué)差異（p>0.05）。幼鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元自發(fā)性放電頻率，正常組為：1.15±0.69 Hz，母子隔離3h組為：3.64±2.84Hz，明顯比正常組要快（p<0.01）、而母子隔離15min組為：1.36±0.83 Hz，與正常組比較無顯著性差異（p>0.05）。
　　 結(jié)論：早期母子隔離3小時的應(yīng)激通過增加海馬CA1錐體神經(jīng)元興奮性、減少GABAA受體α1亞單位表達，導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)興