反義P44探討P44-XPD亞復(fù)合物對人肝癌細胞SMMC-7721的生物學(xué)影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：應(yīng)用反義P44轉(zhuǎn)染人肝癌細胞SMMC-7721，觀察轉(zhuǎn)染后細胞內(nèi)野生型p44、xpd、cdk7、cdk2、cdc25A、c-myc等基因的表達變化以及對細胞生長的影響。探討P44基因與xpd、cdk7、cdk2、cdc25A，c-myc的相互作用，以及對細胞周期的影響。 方法：應(yīng)用P44反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染人肝癌細胞SMMC-7721，并用人肝癌細胞SMMC-1721作為空白對照。用RT—PCR法檢測細胞克隆中P44 mRNA

2、表達，用RT-PCR、Western blot法檢測轉(zhuǎn)染P44反義寡核苷酸后細胞內(nèi)人剪切修復(fù)基因xpd以及癌基因cdk7、cdk2，cdc25A、c-myc的表達量變化，并用MTT和流式細胞儀檢測細胞增殖及其細胞周期的變化。 結(jié)果：P44基因反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染人肝癌細胞SMMC-7721后，具有抑癌作用的人剪切修復(fù)基因xpd mRNA的表達量顯著減少，肝癌內(nèi)的分子網(wǎng)絡(luò)出現(xiàn)相應(yīng)的變化，細胞周期調(diào)控基因cdk7、cdk2、cdc25A

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