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1、研究背景與目的: 大腸癌是最常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一,并有逐年上升趨勢(shì)。但大腸癌的病因還沒有完全明確。自從人們?cè)诖竽c癌組織以及正常粘膜中發(fā)現(xiàn)雌激素受體(ER),特別是近年來發(fā)現(xiàn)ERβ表達(dá)陽(yáng)性,大腸癌的發(fā)生與雌激素的關(guān)系引起了許多學(xué)者的重視。從大腸癌的患病率來看,絕經(jīng)前的年齡顯然男性高于女性,而且已知直腸癌的患病率也是男性高于女性,由此考慮雌激素有可能使結(jié)腸癌和直腸癌的危險(xiǎn)降低;大多數(shù)激素替代治療(HRT),觀察結(jié)果表明絕經(jīng)期婦
2、女服用激素后可明顯降低大腸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),有流行病學(xué)研究顯示進(jìn)行持續(xù)HRT可以降低大腸癌的發(fā)生率達(dá)20%-30%,表明雌激素可能對(duì)大腸癌的發(fā)生有抑制作用。有研究發(fā)現(xiàn),大腸癌組織中ERβ表達(dá)呈選擇性缺失,ERβ可能是大腸癌發(fā)生的潛在抑制因子。而針對(duì)大腸癌組織中ER表達(dá)陽(yáng)性,有學(xué)者提出大腸癌可能是雌激素依賴性腫瘤,認(rèn)為利用雌激素拮抗劑對(duì)大腸癌行抗雌激素治療有效。但目前大腸癌與雌激素、雌激素拮抗劑的研究較少,并且爭(zhēng)論較多。本研究擬以雌激素(17
3、β-雌二醇)和雌激素拮抗劑(ICI 182,780)為干預(yù)物質(zhì),觀察其對(duì)大腸癌細(xì)胞SW480體外增殖的影響,探討雌激素、雌激素拮抗劑對(duì)大腸癌生長(zhǎng)的作用及作用機(jī)制。期望通過觀察雌激素、雌激素拮抗劑對(duì)大腸癌細(xì)胞SW480體外增殖的作用,為研究大腸癌的發(fā)生、治療提供新的途徑。 材料與方法: (一)17 β-雌二醇(E2)對(duì)SW480細(xì)胞體外增殖的影響:SW480細(xì)胞經(jīng)常規(guī)培養(yǎng)擴(kuò)增后分6組:組1,無(wú)干預(yù)(對(duì)照組);組2:加E2
4、10-9 mol/L(0.001 μ mol/L);組3:加E2 10-8 mol/L(0.01 μ mol/L);組4:加E2 10-7 mol/L(0.1 μ mol/L);組5:加E2 10-6 mol/L(1 μ mol/L);組6:加E2 10-5 mol/L(10 μ mol/L)。分別在0、24、48、72h用MTT法測(cè)光吸收度值(OD值)。 (二)ICI 182,780 (ICI)、ICI加E2對(duì)SW480細(xì)胞體
5、外增殖的影響:SW480細(xì)胞經(jīng)常規(guī)培養(yǎng)擴(kuò)增。首先觀察ICI對(duì)SW480細(xì)胞的影響,分為4組:組1,無(wú)干預(yù)(對(duì)照組);組2,加ICI 10-5 mol/L;組3,加ICI 10-6 mol/L;組4,加ICI 10-7 mol/L;48h后MTT法測(cè)光吸收度值(OD值)。然后觀察ICI加E2對(duì)SW480細(xì)胞增殖的影響,分為4組:組1,無(wú)干預(yù)(對(duì)照組);組2,加E2(10 μmol/L);組3,加ICI(1 μmol/L);組4,加E2(1
6、0 μmol/L)和ICI(1 μmol/L),分別在0、24、48、72h用MTT法測(cè)光吸收度值(OD值)。 結(jié)果: (一)17 β-雌二醇(E2)對(duì)SW480細(xì)胞體外增殖的影響:SW480細(xì)胞經(jīng)各濃度E2干預(yù)后,組4、組5、組6各時(shí)間點(diǎn)OD值較對(duì)照組均低。組2、組3與對(duì)照組比較各時(shí)間點(diǎn)OD值無(wú)明顯差別(P>0.05)。48h時(shí)對(duì)照組OD值是0.86±0.03,是組4(0.81±0.02)、組5(0.78±0.01)、
7、組6(0.75±0.02)的1.06-1.15倍,組4、組5、組6與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。72h時(shí)對(duì)照組OD值是1.12±0.15,是組5(0.93±0.06)、組6(0.87±0.14)的1.21、1.29倍(P<0.05),組5、組6與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),組2、組3、組4與對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 (二)ICI 182,780(ICI)、ICI加E2對(duì)SW480細(xì)胞體外增
8、殖的影響:SW480細(xì)胞經(jīng)各濃度ICI干預(yù)后,組2、組3、組4與對(duì)照組比較OD值無(wú)明顯變化,差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).ICI加E2對(duì)SW480細(xì)胞增殖的影響:0、24、48、72h各時(shí)間點(diǎn)OD值,組2較對(duì)照組均低,組3、組4與對(duì)照組比較無(wú)明顯差別。72h時(shí),對(duì)照組OD值(1.11±0.11)是組2(0.84±0.07)的1.32倍,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),組3、組4與對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05). 結(jié)論:
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