代謝型谷氨酸受體興奮劑DHPG對大鼠海馬PP通路的影響.pdf

1、目的：觀察Ⅰ組代謝型谷氨酸受體興奮劑3，5-二羥基苯氨酸（DHPG）對大鼠海馬CA1區(qū)穿通通路（perforant pathway PP通路）產(chǎn)生長時程抑制的作用。 方法：實驗用20-30天的Wistar大鼠，麻醉后斷頭法分離其大腦組織，在4℃冰冷溶液中冷卻5分鐘。濾紙吸干水分后將腦組織固定在切片托上，在同樣的冰冷溶液中用振動切片機(jī)切出400μm厚的腦片，分離出海馬組織，切除齒狀回，同時切斷CA1和CA3之間的聯(lián)系，以防止非記錄

2、電活動的干擾和癲癇樣放電。迅速將腦片轉(zhuǎn)入25℃的人工腦脊液中孵育。實驗分為DHPG作用組、DHPG和D-AP5作用組、雙脈沖刺激（PPR）組，每組腦片數(shù)量分別為8，9，8片。在腦片孵育1-8小時后將單個腦片轉(zhuǎn)入記錄槽，它將持續(xù)浸泡在流速為1.5-2ml/min的腦脊液中，溫度是室溫25℃，木防己苦毒素將加入腦脊液中，它可阻止其他受體的放電。用蓋網(wǎng)固定法固定腦片，采用電生理的方法記錄三組腦片在加藥前后的刺激腦片所產(chǎn)生電活動的變化情況。

3、 結(jié)果：DHPG作用組基線穩(wěn)定均值為1.0049±0.101，給予DHPG（100-200 mol·L-6，10分鐘），藥物洗掉20-25分鐘場電位下降為0.7904±0.02197（n=8，t=15，p<0.01）；DHPG和D-AP5給予N-甲基-D-天冬氨酸受體（NMDAR）特異性拮抗劑AP5后，基線水平為1.0224±0.0724，用藥DHPG（100-200 mol·L-6，10分鐘），藥物洗掉20-25分鐘降為0.828

4、±0.01475（n=9，t=15，p<0.01）；雙脈沖刺激（PPR）組加藥前記錄的PPR其比值為0.9525±0.1691，加入DHPG（100-200mol·L-6，10分鐘），40min后再次測PPR比值為1.0511±0.2934，前后相比有顯著差異。 結(jié)論：該實驗條件誘發(fā)的長時程抑制（LTD）是非NMDA受體依賴型，而是Ⅰ組代謝型谷氨酸受體（mGluRs）依賴型的；由雙脈沖刺激記錄顯示LTD的誘發(fā)機(jī)制是突觸后的原因所