高脂喂養(yǎng)對子代大鼠下丘腦NPY、POMC、GHS-R、GLP-1R基因表達的影響.pdf

1、目的：
　　 成年期肥胖的發(fā)生不僅與個體不良飲食結構有關，更取決于其營養(yǎng)代謝模式。肥胖易感人群多存在營養(yǎng)代謝模式異常，而這種不良代謝模式形成于胎兒期。母體過量的營養(yǎng)攝入（如高脂飲食）可造成子代代謝遺傳缺陷。機體維持能量代謝動態(tài)平衡主要依靠胃腸信號-神經中樞傳導途徑。目前已經確認下丘腦是中樞神經系統(tǒng)調控攝食的主要組成部分，下丘腦神經元分泌的神經肽Y（neuorpeptideY，NPY）、阿片促黑色素原（proopiomelanoc

2、orein，POMC）等神經肽在攝食和能量平衡的調節(jié)中發(fā)揮著十分重要的作用。與肥胖相關的胃腸激素主要包括饑餓素（Ghrelin）、胰高血糖素樣肽（GLP-1），其作用受體分別為生長激素促分泌素受體（GHS-R）和胰高血糖素樣肽受體（GLP-1R）。胃腸激素對中樞神經多肽的調節(jié)作用，及對肥胖發(fā)生、發(fā)展影響尚不清楚，是目前肥胖領域的研究熱點。本研究采用高脂喂養(yǎng)周產期及離乳后子代大鼠，觀察不同性別間下丘腦食欲調控基因NPY、POMC、GSH-

3、R、GLP-1R mRNA表達水平的變化，探討它們對大鼠體重及能量攝入量的影響。
　　 材料與方法：
　　 健康成熟Wistar雌性處女鼠36只，成熟雄性Wistar鼠9只，適應性喂養(yǎng)1周后，隨機選擇雌雄大鼠按4:1比例合籠。雌鼠確認懷孕后按受孕順序隨機分為普食（SD）組和高脂（HFD）組，分別投喂基礎飼料和高脂飼料，兩組飼料喂養(yǎng)從妊娠期至產后10天（即周產期）。
　　 仔鼠出生后按隨機原則每窩各留8只（雌、雄各

4、4只），兩組子代大鼠隨機分為高脂組及普食組，分別投喂高脂飼料及基礎飼料。即分為：①親代高脂子代高脂（HFD/HFD）組；②親代高脂子代普食（HFD/SD）組；③親代普食子代高脂（SD/HFD）組；④親代普食子代普食（SD/SD）組。
　　 子代大鼠出生后每周稱量體重，每2至3天記錄投食量、剩食量，計算攝食量、能量攝入量。子代大鼠喂養(yǎng)16周后，禁食12小時后，麻醉下抽血處死，斷頭取出腦組織，分離下丘腦。用Real-time PCR

5、方法檢測下丘腦NPY、POMC、GHS-R、GLP-1R mRNA相對表達水平。所有數據均以x±s表示，應用SPSS11.0軟件進行方差分析，p值小于0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：
　　 1、仔鼠出生后隨日（周）齡的增加，體重不斷增加，8周前增長十分迅速。高脂飼料喂養(yǎng)大鼠體重增長速度明顯高于對照組，這種差異在雄性子代表現更加明顯。出生時HFD組體重高于SD組P<0.05，哺乳期結束后這種差異在雄性子代中變現

6、更加明顯。從第8周以后HFD/HFD組體重高于HFD/SD組（雄性和雌性）P<0.05。從第10周以后HFD/SD組與SD/SD組體重無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。
　　 2、子代大鼠能量攝入量與體重成正相關。8周前能量攝入量顯著增加，雄性子代增長速度更加明顯P<0.05。8周前HFD組高于SD組P<0.05，8周后HFD/HFD組高于HFD/SD組P<0.05。10周HFD/SD組與SD/SD組能量攝入量無統(tǒng)計學差異P>0.0

7、5。
　　 3、子代大鼠喂養(yǎng)16周后，雌性HFD/HFD、SD/HFD組下丘腦GHS-R和NPY mRNA表達水平明顯高于SD/SD組，差別有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；HFD/SD組下丘腦NPY mRNA表達水平明顯高于SD/SD組，差別有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；雄性子代間下丘腦GHS-R和NPY mRNA表達水平各組無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。雄性HFD/HFD、SD/HFD組下丘腦GLP-1R、POMC mRNA表達

8、水平明顯低于SD/SD組，差別有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；HFD/SD組GLP-1R mRNA表達水平明顯低于SD/SD組，差別有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；雌性子代間各組下丘腦GLP-1R、POMC mRNA表達水平無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。
　　 4、雄性子代，能量攝入量與體重呈正相關，下丘腦GLP-1R、POMC mRNA表達水平與能量攝入量和體重呈負相關，GLP-1RmRNA表達水平與POMC mRNA表達水平呈正

9、相關。在雌性子代，能量攝入量與體重呈正相關，下丘腦GHS-R、NPY mRNA表達水平與能量攝入量呈正相關，GHS-R mRNA表達水平與NPYmRNA表達水平呈正相關。
　　 結論：
　　 1、能量攝入量與體重呈正相關，GHS-R和NPY與能量攝入量呈正相關，GLP-1R和POMC與體重和能量攝入量呈負相關。
　　 2、高脂喂養(yǎng)狀態(tài)下丘腦食欲調控基因在不同性別間表達水平不同，高脂喂養(yǎng)狀態(tài)下，雄性大鼠體重及能量攝