GLP-1R、PKA在糖尿病骨質(zhì)疏松大鼠腎組織中表達(dá).pdf

1、目的:當(dāng)今世界，隨著經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展和工業(yè)化進(jìn)程的加速，人類健康面臨非傳染性疾病的威脅正日益增加，糖尿病患病率和糖尿病患者數(shù)量急劇上升。腸促胰素是人體內(nèi)一種腸源性激素，在進(jìn)食后，該類激素的釋放可促進(jìn)胰島素分泌，發(fā)揮葡萄糖濃度依賴性降糖作用，從而為人類治療糖尿病提供了嶄新的思路。GLP-1（Glacogon-likePeptide-1，胰高血糖素樣肽-1）作為腸促胰素的一種，其胰腺效應(yīng)及其他生物學(xué)效應(yīng)逐漸引起人們的注意。GLP-1受體表達(dá)于

2、胰腺，腸，中樞神經(jīng)系統(tǒng)，肺，腎臟和心臟等組織。GLP-1可發(fā)揮降脂、降壓作用，從而對(duì)心血管系統(tǒng)產(chǎn)生保護(hù)作用;作用于中樞增強(qiáng)學(xué)習(xí)和記憶功能，保護(hù)神經(jīng);通過(guò)抗腎組織纖維化、減少氧化應(yīng)激、降低尿蛋白等對(duì)腎臟組織起保護(hù)作用;抑制骨吸收，保護(hù)骨骼等。眾多的受體與受體后傳導(dǎo)途徑及效應(yīng)器組成一個(gè)極為復(fù)雜的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)，在此網(wǎng)絡(luò)中，任一部分的變化都可能影響到整個(gè)系統(tǒng)，從而引起相應(yīng)生物學(xué)效應(yīng)的變化，許多因素可以通過(guò)不同的機(jī)制影響細(xì)胞的受體數(shù)目和（或）受體

3、對(duì)配體的親和力，受體水平的變化與人生理狀態(tài)及疾病具有一定相關(guān)性。目前尚無(wú)糖尿病合并骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型腎組織GLP-1R（Glacogon-likePeptide-1Receptor，胰高血糖素樣肽-1受體）、PKA(ProteinKinaseA，PKA，cAMP依賴蛋白激酶，簡(jiǎn)稱激酶A)表達(dá)情況的報(bào)道，本研究旨在為研究糖尿病、骨質(zhì)疏松、糖尿病腎病及糖尿病骨質(zhì)疏松的發(fā)病機(jī)制及治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)，探討GLP-1R、PKA在糖尿病合并骨

4、質(zhì)疏松大鼠腎組織的表達(dá)情況。
　　 方法:100只健康雌性Wistar大鼠(2.5-3月齡)經(jīng)喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分成正常對(duì)照組（假手術(shù)組，NC組，N=24），單純?nèi)ヂ殉步M(NOVX組，N=26)，糖尿病對(duì)照組（糖尿病假手術(shù)組，DC組，N=24），糖尿病去卵巢組(DOVX組，N=26)。各組間大鼠體重差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。小劑量STZ腹腔注射法聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)制作糖尿病大鼠模型;雙側(cè)卵巢切除法制作骨質(zhì)疏松大鼠模型。術(shù)后4周、8周、12周于

5、各組內(nèi)隨機(jī)取4只大鼠，經(jīng)麻醉處死后分離腎臟，快速腎組織取材，蠟塊包埋，采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)NC組、NOVX組、DC組、DOVX組腎組織中GLP-1R、PKA水平的表達(dá)。處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±S）表示，各組數(shù)據(jù)符合正態(tài)性分布，組間比較采用單因素方差分析(one-wayANOVA)S-N-K法和Dunnett'sT3法，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:<

6、br>　　 1、各組腎組織HE染色
　　 NC組及NOVX組大鼠腎組織腎小球結(jié)構(gòu)清晰，血管袢薄而清晰，內(nèi)皮細(xì)胞和系膜細(xì)胞數(shù)正常，腎小管正常;DC組及DOVX組腎臟腎小球毛細(xì)血管內(nèi)可見(jiàn)嗜酸性物質(zhì)增多，內(nèi)皮細(xì)胞和系膜細(xì)胞數(shù)量增加，腎小管基膜增厚。
　　 2、各組腎組織GLP-1R表達(dá)
　　 GLP-1R表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞的胞膜和胞漿。去卵巢后4周、8周、12周，NOVX組、DOVX組表達(dá)均低于相應(yīng)對(duì)照組，4周、8

7、周NOVX組與NC組比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。DC、DOVX組大鼠腎組織GLP-1R水平隨時(shí)間變化表達(dá)下降。
　　 3、各組腎組織PKA表達(dá)
　　 PKA表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞的胞漿。去卵巢后4周，NC組表達(dá)明顯低于NOVX組、DC組、DOVX組;去卵巢后8周，DOVX組明顯低于NC組;去卵巢后12周，NC組明顯低于DC組。
　　 結(jié)論:
　　 1、DC、DOVX組腎組織GLP-1R水平隨時(shí)間變化表達(dá)下降，可能與糖尿