2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、目的:骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis,OP)作為一種“靜悄悄的流行病”逐漸被認(rèn)識(shí)。大量研究證實(shí),1型糖尿病(Type1 diabetic metabolism,T1DM)可導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生,但2型糖尿病(Type2 diabeticmetabolism,T2DM)與骨質(zhì)疏松癥的關(guān)系尚不明確,有研究認(rèn)為這可能與胰島素信號(hào)通路有關(guān)。胰島素信號(hào)通路的主要下游分子因子磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphoinositide3-kinase

2、,PI3K)、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(Akt)表達(dá)下降在糖尿病和胰島素抵抗發(fā)病機(jī)制中起重要作用。核因子κB(NFκB)信號(hào)通路可誘導(dǎo)破骨細(xì)胞分化、延長(zhǎng)破骨細(xì)胞生存時(shí)間、促進(jìn)骨吸收。研究發(fā)現(xiàn)PI3K-Akt信號(hào)通路通過調(diào)節(jié)NFκB、mTOR(mammaliantarget of rapamycin)等下游因子對(duì)細(xì)胞增殖、凋亡、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)等多種生物活動(dòng)起調(diào)節(jié)作用。胰島素抵抗主要發(fā)生在腎臟和骨骼肌,但在糖尿病晚期往往并發(fā)糖尿病腎病,同時(shí)腎臟通

3、過調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞之間的平衡參與骨質(zhì)疏松的發(fā)生、發(fā)展過程。2型糖尿病合并骨質(zhì)疏松腎組織。PI3K、Akt、NFκB表達(dá)如何,目前尚無報(bào)道,本研究旨在探討PI3K、Akt、NFκB在2型糖尿病合并骨質(zhì)疏松大鼠腎組織表達(dá),為研究糖尿病骨質(zhì)疏松的發(fā)病機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。
  方法:100只健康雌性Wistar大鼠(2.5-3月齡)喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為正常對(duì)照組(假手術(shù)組,NS組,N=24),單純?nèi)ヂ殉步M(NOVX組,N=26

4、),2型糖尿病對(duì)照組(假手術(shù)組,DS組,N=24),2型糖尿病去卵巢組(DOVX組,N=26)。組間大鼠體重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。去卵巢后4周、8周、12周各組隨機(jī)選取5只大鼠,麻醉處死后分離腎臟,腎組織取材并提取腎組織總RNA,應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)NS組、NOVX組、DS組、DOVX組腎組織PI3K、Akt1、Akt2、NFκB蛋白水平的表達(dá),反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測(cè)PI3K、Akt1、Akt2、NFκB mRNA水

5、平的表達(dá)。應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示,計(jì)量資料多組間比較采用方差分析,P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  結(jié)果:
  1.腎臟病理變化(HE染色):光鏡下可見非糖尿病組腎臟腎小球結(jié)構(gòu)清晰,腎小球血管袢薄而清晰。內(nèi)皮細(xì)胞和系膜細(xì)胞數(shù)目正常。NS組與NOVX組無明顯區(qū)別。DS組及DOVX組腎臟腎小球毛細(xì)血管內(nèi)可見嗜酸性物質(zhì)增多,內(nèi)皮細(xì)胞和系膜細(xì)胞數(shù)量增加。
  

6、2.腎臟PI3K表達(dá)水平
  2.1 免疫組化結(jié)果:PI3K表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞胞核和胞漿。去卵巢后4周、8周時(shí),DOVX組、DS組表達(dá)明顯低于NS組(P<0.05),NOVX組與NS組之間無明顯差異(P>0.05);去卵巢后12周時(shí),NOVX組、DS組、DOVX組表達(dá)明顯低于NS組(P<0.05),DS組與DOVX組之間無顯著差異(P>0.05)。
  2.2 RT-PCR結(jié)果:去卵巢后4周時(shí)NOVX組明顯高于NS組(P<

7、0.05),DOVX組明顯低于DS組(P<0.05),DS組和DOVX組分別明顯高于NS組和NOVX組(P<0.05);去卵巢后8周時(shí)NOVX組明顯低于NS組(P<0.05),DOVX組明顯高于DS組和NOVX組(P<0.05),DS組明顯低于NS組(P<0.05);12周時(shí)NOVX組明顯高于NS組(P<0.05),DOVX組明顯低于DS組和NOVX組(P<0.05),DS組明顯高于NS組(P<0.05)。
  3.腎臟Akt1表

8、達(dá)水平
  3.1 免疫組化結(jié)果:Akt1表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞胞漿。去卵巢后4周、8周時(shí)DOVX組、DS組表達(dá)明顯低于NS組(P<0.05),NOVX組與NS組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);去卵巢后12周DOVX組、DS組、NOVX組、NS組之間無顯著差異(P>0.05)。
  3.2 RT-PCR結(jié)果:去卵巢后4周時(shí)NOVX組低于NS組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),DOVX組明顯低于DS組(P<0.05),DS組明

9、顯高于NS組(P<0.05),DOVX組低于NOVX組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);去卵巢后8周NOVX組明顯高于NS組(P<0.05),DOVX組高于DS組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),DS組明顯低于NS組(P<0.05),DOVX組明顯低于NOVX組(P<0.05);去卵巢后12周NOVX組明顯高于NS組(P<0.05),DOVX組明顯低于DS組(P<0.05),DS組明顯高于NS組(P<0.05),DOVX組明顯低于NOV

10、X組(P<0.05)。
  4.腎臟Akt2表達(dá)水平
  4.1 免疫組化結(jié)果:Akt2主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞胞漿。去卵巢后4周時(shí)DOVX組、DS組、NOVX組表達(dá)明顯低于NS組(P<0.05);去卵巢后8周DS組表達(dá)明顯低于DOVX組、NS組、NOVX組(P<0.05),DOVX組、NOVX組明顯低于NS組(P<0.05);去卵巢后12周DOVX組、DS組、NOVX組表達(dá)明顯低于NS組(P<0.05)。
  4.2

11、 RT-PCR結(jié)果:去卵巢后4周NOVX組明顯高于NS組(P<0.05),DOVX組明顯低于DS組(P<0.05),DS組低于NS組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),DOVX組明顯低于NOVX組(P<0.05);去卵巢后8周NOVX組高于NS組,DOVX組低于DS組,DS組低于NS組,DOVX組低于NOVX組,但均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);去卵巢后12周NOVX組明顯高于NS組(P<0.05),DOVX組明顯低于DS組(P<0.05

12、),DS組明顯低于NS組(P<0.05),DOVX組明顯低于NOVX組(P<0.05)。
  5.腎臟NFκB表達(dá)水平
  5.1 免疫組化結(jié)果:NFκB主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞胞漿。去卵巢后4周、8周時(shí)NS組、NOVX組、DS組、DOVX組之間無顯著差異(P>0.05);去卵巢后12周DS組表達(dá)顯著低于NS組(P>0.05),DOVX組、NOVX組與DS組、NS組之間無顯著差異(P>0.05)。
  5.2 RT-P

13、CR結(jié)果:NFκB表達(dá)在去卵巢后4周時(shí)NOVX組明顯高于NS組(P<0.05),DOVX組低于DS組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),DS組明顯高于NS組(P<0.05),DOVX組低于NOVX組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);去卵巢后8周NOVX組高于NS組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),DOVX組明顯低于DS組(P<0.05),DS組明顯低于NS組(P>0.05),DOVX組明顯低于NOVX組(P<0.05);去卵巢后12周時(shí)N

14、OVX組明顯高于NS組(P<0.05),DOVX組明顯低于DS組(P<0.05),DS組明顯高于NS組(P<0.05),DOVX組明顯低于NOVX組(P<0.05)。
  結(jié)論:
  1.單純?nèi)ヂ殉泊笫驪I3K、Akt1、Akt2、NFκB在腎組織表達(dá)較正常對(duì)照組大鼠顯著降低。
  2.2型糖尿病大鼠PI3K、Akt1、Akt2、NFκ3在腎組織表達(dá)較正常對(duì)照組大鼠降低。
  3.2型糖尿病骨質(zhì)疏松大鼠PI3K、

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