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文檔簡介
1、蜂膠(Propolis)是西方蜜蜂(Apis mellifera)采集植物樹脂分泌物并混入自身上顎腺、蠟腺等分泌物加工混合而成的膠狀固形物。蜂膠的化學(xué)成分復(fù)雜,是多成分、多靶點的復(fù)雜體系,具有抑菌、抗氧化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)以及抗腫瘤等多種生物學(xué)活性,廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健及日化等領(lǐng)域。
膠源植物是影響蜂膠化學(xué)成分及生物學(xué)活性的重要因素。在巴西東南部及中西部地區(qū),來源于酒神菊屬植物(Baccharis)的巴西綠蜂膠因其獨特的化學(xué)成分
2、及強效的保健功效在世界蜂膠市場上備受追捧。大量研究表明,巴西綠蜂膠顯著的抗炎、抗腫瘤、護肝、神經(jīng)保護及調(diào)節(jié)血糖血脂等活性都與其抗氧化作用有關(guān)。而蜂膠的抗氧化活性是其多種化學(xué)成分相互作用的整合結(jié)果,這是蜂膠的優(yōu)勢,但同時也給蜂膠的質(zhì)量控制造成了極大的困難。
因此,本研究采用分光光度法、高效液相色譜/電噴霧-質(zhì)譜法(HPLC-ESI-MS/MS)以及離線HPLC-DPPH法,對巴西綠蜂膠的化學(xué)成分及抗氧化活性進行了測定;建立了巴西
3、綠蜂膠的化學(xué)指紋圖譜,確定了共有成分峰,同時對特征性化學(xué)成分進行定量測定;并篩選評價了巴西綠蜂膠的抗氧化活性成分,建立了抗氧化活性指紋圖譜。本研究對巴西綠蜂膠的質(zhì)量控制以及抗氧化活性研究具有重要意義。具體研究內(nèi)容與結(jié)果如下:
1.首先對巴西綠蜂膠的多酚類化合物及抗氧化活性進行了初步評價。采用分光光度法測定了22個不同批次巴西綠蜂膠中總黃酮、總酚酸的含量,同時對其DPPH自由基清除活性進行了測定,并考察了兩者的相關(guān)性。結(jié)果表明,
4、不同批次綠蜂膠中總黃酮含量相對較低,而總酚酸含量相對較高;DPPH自由基清除活性與總酚酸含量呈現(xiàn)顯著的正相關(guān),而與總黃酮含量無顯著的相關(guān)性。
2.優(yōu)化建立了不同批次巴西綠蜂膠的高效液相色譜指紋圖譜,確定了巴西綠蜂膠的共有化學(xué)成分。并進一步采用電噴霧-質(zhì)譜法對巴西綠蜂膠的指紋圖譜進行了定性分析,結(jié)合已有標準品及文獻資料初步確認了其中14個多酚類化合物,其中4個黃酮類化合物,10個酚酸及其酯類化合物。
3.建立了巴西綠蜂
5、膠中9個特征性化學(xué)成分(綠原酸、咖啡酸、p-香豆酸、3,5-二咖啡??鼘幩帷?,5-二咖啡??鼘幩?、3,4,5-三咖啡??鼘幩帷⑸侥畏?、山奈素及阿替匹林C)含量檢測的反向高效液相色譜法。結(jié)果表明,阿替匹林C是巴西綠蜂膠中含量最為豐富的多酚類化合物,咖啡??鼘幩犷惢衔镆彩瞧渲饕奶卣餍猿煞?不同批次綠蜂膠化學(xué)組成基本相同,而含量上存在差異。
4.采用離線HPLC-DPPH法研究了巴西綠蜂膠的抗氧化活性成分,同時結(jié)合多變量相關(guān)性
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