豐白散對慢性阻塞性肺疾病模型大鼠支氣管肺組織中MMP-9及其抑制物TIMP-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的:通過觀察豐白散對慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠支氣管肺組織形態(tài)學(xué)及支氣管肺組織中MMP-9及其抑制物TIMP-1表達(dá)的影響,初步揭示COPD的部分發(fā)病機(jī)理和豐白散治療COPD的作用機(jī)制,為指導(dǎo)臨床應(yīng)用和開發(fā)新藥提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:健康雄性Wistar大鼠46只隨機(jī)分為正常組和造模組。正常組不予干預(yù)正常喂養(yǎng);造模組采用熏香煙加氣管內(nèi)滴加脂多糖方法復(fù)制COPD大鼠模型。造模完成后,再將造模組大鼠隨機(jī)分成3組

2、:模型組、沐舒坦組、豐白散組,模型組予生理鹽水、沐舒坦組予鹽酸氨溴索混懸液(沐舒坦)、豐白散組予豐白散混懸液灌胃各28天。取肺組織切片行蘇木素-伊紅(HE)染色評估大鼠支氣管肺組織病理形態(tài)學(xué)改變,并采用圖像分析系統(tǒng)測量各組大鼠支氣管形態(tài)學(xué)參數(shù)(支氣管管壁厚度、平滑肌層厚度);使用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)分析比較各組大鼠肺組織中MMP-9及其抑制物TIMP-1mRNA表達(dá)水平;用免疫組化法測定各組大鼠支氣管肺組織中MMP

3、-9及其抑制物TIMP-1蛋白表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:1.病理組織形態(tài)學(xué)改變:模型組、沐舒坦組、豐白散組大鼠支氣管肺組織均出現(xiàn)了COPD病理學(xué)特征性改變及氣道重塑表現(xiàn),說明COPD大鼠模型復(fù)制成功。豐白散組、沐舒坦組大鼠COPD病理改變較模型組明顯減輕。
　　 2.逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:與正常組相比,模型組大鼠肺組織中MMP-9及其抑制物TIMP-1mRNA表達(dá)水平明顯升高,有顯著性差異(p＜0.

4、05);與模型組相比,豐白散組大鼠肺組織中MMP-9、TIMP-1mRNA表達(dá)較之下降,有顯著差異性(p＜0.05)。
　　 3.免疫組化法結(jié)果:與正常組相比,模型組大鼠支氣管肺組織中MMP-9、TIMP-1表達(dá)明顯升高,有顯著性差異(p＜0.05);與模型組相比較,豐白散組大鼠支氣管肺組織中MMP-9、TIMP-1表達(dá)較之下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　 結(jié)論:1.本實(shí)驗(yàn)采用熏香煙加氣管內(nèi)滴加脂多糖方法復(fù)

5、制COPD大鼠模型,COPD模型大鼠出現(xiàn)慢性支氣管炎和阻塞性肺氣腫的典型病理形態(tài)學(xué)改變,說明COPD大鼠模型復(fù)制成功。
　　 2.經(jīng)各組大鼠支氣管形態(tài)學(xué)測量參數(shù)(支氣管管壁厚度、平滑肌層厚度)比較,COPD模型大鼠該兩參數(shù)明顯升高,提示氣道重塑形成。
　　 3.通過觀察COPD模型大鼠支氣管肺組織中MMP-9及TIMP-1表達(dá)水平,二者過度表達(dá)說明MMP-9/TIMP-1失衡,與氣道重塑有關(guān),證實(shí)蛋白酶-抗蛋白酶失衡是C