“丹參-降香”君-使對藥藥代動力學及作用物質(zhì)基礎(chǔ)研究.pdf

1、復方作為中藥臨床用藥的主要形式，集中體現(xiàn)了中醫(yī)藥理論“辨證施治”的思想和治療原則，而復方作用物質(zhì)基礎(chǔ)研究一直是中藥研究的熱點和難點。對藥作為復方和單味藥之間的橋梁，具有組成簡單、便于研究的特點，而君-使對藥則是由復方中的君藥和使藥搭配而成的特殊對藥，集中體現(xiàn)了復方的協(xié)同增效作用。代謝組學作為一門以定量描述生物體內(nèi)代謝物多參數(shù)動態(tài)變化為目標的新興組學，在研究思路的整體性和系統(tǒng)性方面與中醫(yī)藥傳統(tǒng)理論相吻合，因此近年來在中醫(yī)藥領(lǐng)域得到了前所未

2、有的應用和發(fā)展。本文選擇丹參-降香君使對藥為研究對象，以丹參素、原兒茶醛、原兒茶酸為指標，以代謝組學為手段，研究使藥降香對君藥丹參藥代動力學的影響和體內(nèi)作用物質(zhì)基礎(chǔ)。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　 ⑴建立了同時測定SD大鼠含藥血漿中丹參素、原兒茶酸、原兒茶醛的高效液相色譜分析方法。方法學考察表明，丹參素、原兒茶酸、原兒茶醛的檢出限分別為0.25，0.2和0.125μg/mL，分別在250～2.5，200～2.0，125～1.25

3、μg/mL內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，高、中、低三個濃度的提取回收率在91.17～97.02％之間，方法回收率在81.39～97.66％之間；日內(nèi)日間精密度、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性的測定結(jié)果符合分析測定的要求；三種指標性外源性成分與血漿中的內(nèi)源性成分均達到基線分離。以上結(jié)果表明該方法適合于大鼠血漿中丹參素、原兒茶醛和原兒茶酸的藥代動力學研究。
　　 ⑵采用上述高效液相色譜方法，考察了在正常SD大鼠體內(nèi)使藥降香對君藥丹參藥代動力學的影響，并采用

4、代謝組學的數(shù)據(jù)處理方法進行處理。結(jié)果表明：①使藥降香可顯著提高正常大鼠體內(nèi)丹參素吸收入血的速率及生物利用度，減慢丹參素和原兒茶酸的清除率，延長在體內(nèi)的停留時間以更好的發(fā)揮藥理活性，從而很好的證明了使藥降香的協(xié)同增效機制。②研究發(fā)現(xiàn)丹參藥材中的水溶性成分原兒茶醛在SD大鼠體內(nèi)通過一定的生理生化途徑轉(zhuǎn)化為原兒茶酸，并有兩種代謝產(chǎn)物NM28和NM29生成。③主成分分析和SPSS相關(guān)性分析結(jié)果表明，代謝產(chǎn)物NM28、NM29和NM38、內(nèi)源性物

5、質(zhì)色氨酸是引起正常丹參組和正常丹參降香組間出現(xiàn)顯著差異的主要原因，即可能與正常大鼠體內(nèi)丹參-降香君-使對藥的作用物質(zhì)基礎(chǔ)有一定的關(guān)系。
　　 ⑶考察氣滯血瘀模型大鼠灌胃丹參提取液和丹參-降香提取液后，使藥降香對君藥丹參中主要成分的藥代動力學的影響，并采用代謝組學方法處理數(shù)據(jù)。結(jié)果表明：①模型丹參組大鼠體內(nèi)，使藥降香在顯著加快丹參素和原兒茶酸吸收入血的同時也加快兩者機體的清除。②在正常組原有的代謝產(chǎn)物NM28和NM29的基礎(chǔ)上，模

6、型丹參-降香組中又生成了兩種新的代謝產(chǎn)物NM30和NM38。③采用主成分分析法和SPSS相關(guān)性分析法結(jié)果表明，代謝產(chǎn)物NM28、NM29和NM38、內(nèi)源性物質(zhì)色氨酸是引起兩組間出現(xiàn)顯著差異的主要原因，即可能與氣滯血瘀模型大鼠體內(nèi)丹參-降香君-使對藥的作用物質(zhì)基礎(chǔ)有一定的關(guān)系。
　　 ⑷通過給大鼠分別灌胃丹參素、原兒茶酸和原兒茶醛溶液，與擬定時間點取血測定，結(jié)果表明丹參藥材中的原兒茶醛進入體內(nèi)后被氧化為原兒茶酸，一部分原兒茶酸又被