舒尼替尼對小鼠晚期乳腺癌模型的抑瘤作用研究.pdf

1、目的:本實驗通過構(gòu)建小鼠晚期乳腺癌模型,觀察經(jīng)舒尼替尼、多西他賽及兩種藥物聯(lián)合干預后,對小鼠晚期乳腺癌模型的抑瘤作用,初步探討舒尼替尼能否替代傳統(tǒng)化療成為晚期乳腺癌的一種治療手段,或是與傳統(tǒng)化療結(jié)合能否提高療效,為其能否在晚期乳腺癌的臨床應用提供理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 建立荷4T1乳腺癌小鼠晚期乳腺癌模型,然后將荷瘤小鼠隨機分為四組,分別為對照組(C)、舒尼替尼組(S)、多西他賽組(D)、舒尼替尼聯(lián)合多西他賽組(

2、S+D),實驗結(jié)束后處死小鼠,處死小鼠前測量小鼠體重,用EGF熒光探針尾靜脈注射標記腫瘤,然后用Pearl imager成像系統(tǒng)將小鼠成像,比較4組間腫瘤熒光密度值,然后將瘤組織取出、雙肺取出、比較各組間瘤組織大小、小鼠體重大小、肺轉(zhuǎn)移灶數(shù)目、將移植瘤取出后制備成單細胞懸液用流式細胞儀分析細胞凋亡、細胞周期,通過細胞周期計算增殖指數(shù)(PI),比較各組間腫瘤的凋亡率及PI。
　　 結(jié)果:
　　 1：所有小鼠全部成瘤,用4T

3、1乳腺癌細胞株成功構(gòu)建了小鼠晚期乳腺癌模型。
　　 2：C組小鼠體重18.14±1.25g,S組小鼠體重17.50±2.02 g,D組小鼠體重15.90±2.10g,S+D組小鼠體重17.38±2.15g。所有藥物干預組小鼠體重均較C組為輕,但只有D組與C組比較有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),雖然S組、S+D組小鼠體重較D組為重,但組間比較無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)
　　 3：C組小鼠種植瘤體積3191.46±517.9

4、0mm3,S組小鼠種植瘤體積2518.35±263.46 mm3,S+D組小鼠種植瘤體積1984.42±206.47mm3,D組小鼠種植瘤體積1999.46±278.57mm3。所有藥物干預組小鼠腫瘤體積較C組為小,差異均有有統(tǒng)計學意義(P均＜0.05);S+D組與D組均較S組腫瘤體積為小,差異有統(tǒng)計學意義(P均＜0.05),S+D組腫瘤體積雖小于D組,但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 4：用EGF熒光探針尾靜脈注射標

5、記腫瘤,應用Pearl imager成像系統(tǒng)將小鼠成像,比較4組小鼠種植瘤熒光密度值,分別為:C組小鼠8.58+0.61E3,S組小鼠6.30±0.29 E3,S+D組小鼠3.07±0.36 E3,D組小鼠3.14±0.60 E3。所有藥物干預組小鼠種植瘤熒光密度值較C組為低,差異均有有統(tǒng)計學意義(P均＜0.05);S+D組與D組均較S組為低,差異有統(tǒng)計學意義(P均＜0.05),S+D組雖低于D組,但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。<

6、br>　　 5：體式顯微鏡下計數(shù)雙肺轉(zhuǎn)移灶數(shù)目:4組小鼠雙肺鏡下均可見轉(zhuǎn)移灶,C組中位個數(shù)48、S組31.5、D組14、S+D組7.5,通過統(tǒng)計學比較,S組轉(zhuǎn)移灶數(shù)目與C組比較無統(tǒng)計學意義(P＞0.05),D組及D+S組均較S組及C組轉(zhuǎn)移灶數(shù)目少,且有統(tǒng)計學意義(P均＜0.05)。
　　 6：流式細胞儀檢測種植瘤細胞凋亡率及細胞周期,根據(jù)細胞周期計算增殖指數(shù):4組小鼠種植瘤均有不同程度凋亡:C組凋亡率39.19±16.91％、

7、D組凋亡率39.17±13.01％、S+D組凋亡率46.79±11.30％、S組凋亡率36.37±1.57％,但各組間無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。4組小鼠種植瘤的增殖指數(shù)也不盡相同,分別為:C組46.49±10.77％、S組38.49±6.90％、S+D組42.57±5.34％、D組41.26±8.06％,各組間亦無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 7：將所有腫瘤標本及雙肺常規(guī)石蠟包埋,切片,HE染色,鏡下證實腫瘤為乳腺浸潤

8、性癌,雙肺結(jié)節(jié)證實為癌轉(zhuǎn)移。
　　 結(jié)論:
　　 1：應用4T1乳腺癌細胞株成功構(gòu)建小鼠晚期乳腺癌模型,并可進行進一步實驗研究;
　　 2：舒尼替尼在晚期轉(zhuǎn)移性乳腺癌中具有一定的抗腫瘤作用,但較傳統(tǒng)化療藥物多西他賽為差:
　　 3：舒尼替尼對晚期乳腺癌的原發(fā)灶有一定的抑制作用,但對于轉(zhuǎn)移灶無明顯抑制作用;
　　 4：舒尼替尼聯(lián)合多西他賽雖未增加副作用,但也未能提高療效;
　　 5：舒尼替尼