結(jié)腸癌和直腸癌臨床特點及癌變相關(guān)分子機(jī)制的異同分析.pdf

1、研究背景：
　　 結(jié)直腸癌作為消化系統(tǒng)常見腫瘤之一，近來在我國的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。隨著我國流行病學(xué)調(diào)查的逐漸開展，目前認(rèn)為結(jié)腸癌和直腸癌在發(fā)病模式和病因?qū)W方面存在著明顯差異。在我國直腸癌較結(jié)腸癌多見，但90年代與80年代相比所占比例有所下降，這一變化表明生活習(xí)慣和飲食結(jié)構(gòu)的西方化與結(jié)腸癌的發(fā)病有密切關(guān)系，但相對于直腸癌的關(guān)系較小。同時結(jié)腸癌和直腸癌由于癌變部位的不同，臨床表現(xiàn)存在明顯差異，其相應(yīng)的實驗室檢查、治療手段等方面

2、也存在的異同，流行病學(xué)資料表明結(jié)腸癌和直腸癌在發(fā)生和發(fā)展中肯定存在著差異。目前結(jié)直腸癌的癌變機(jī)制較為明確，其中經(jīng)典的為“正常粘膜一腺瘤一腺癌”的染色體不穩(wěn)定途徑，其中包括一系列按時間順序的癌基因激活和抑癌基因失活，以及Wnt途徑的激活；另一與結(jié)腸癌發(fā)生密切相關(guān)的是微衛(wèi)星不穩(wěn)定途徑。現(xiàn)在的大部分研究將結(jié)腸癌和直腸癌混雜在一起，結(jié)腸癌和直腸癌的發(fā)生過程是否也遵循這兩條途徑，還是各有側(cè)重，癌變的分子機(jī)制有無差異至今為止尚不清楚。近來有報道認(rèn)為

3、在結(jié)腸癌癌變過程中APC，K-ras，p53等基因突變較多見，并且微衛(wèi)星不穩(wěn)定途徑占有一定比例，這些初步的研究說明結(jié)腸癌和直腸癌中基因的表達(dá)是有所不同的，兩者之間可能存在差異，但均有待進(jìn)一步系統(tǒng)研究予以闡明。臨床特點并的異同，在此基礎(chǔ)上通過對結(jié)腸癌和直腸癌中APC，β-catenin，p53、wnt-1、MSH-2和MLH-1等蛋白的變化和K-ras基因突變的檢測，初步探討兩者癌變途徑和重要癌變基因的異同；同時采用基因芯片技術(shù)初步檢測了

4、結(jié)腸癌和直腸癌基因表達(dá)的差異，較為系統(tǒng)地探討了結(jié)腸癌和直腸癌的癌變機(jī)制的異同，研究結(jié)果為制定符合中國人群的預(yù)防和篩查方案，降低腫瘤發(fā)病率及針對性的個性化治療奠定了理論基礎(chǔ)。
　　 研究目的：
　　 本研究首先通過總結(jié)近10年北京協(xié)和醫(yī)院結(jié)腸癌和直腸癌住院病例1906例，回顧性分析其發(fā)病模式的變遷和臨床表現(xiàn)、實驗室檢查、確診方法、病理分期等臨床特點的異同；同時分別選取結(jié)腸癌和直腸癌手術(shù)組織標(biāo)本，通過高通量的基因表達(dá)譜芯片和

5、免疫組化、基因測序等方法，探討結(jié)腸癌和直腸癌癌變過程基因表達(dá)的差異，并針對結(jié)直腸癌癌變的染色體不穩(wěn)定途徑和微衛(wèi)星不穩(wěn)定途徑中的重要蛋白表達(dá)和基因突變的異同進(jìn)行檢測，初步探討我國結(jié)腸癌和直腸癌的發(fā)病模式、臨床特點和癌變過程中分子機(jī)制的異同，為針對不同腫瘤類型進(jìn)行早期診斷和預(yù)防、為大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查以及開展腫瘤篩查提供理論依據(jù)。
　　 研究方法：
　　 回顧性分析總結(jié)北京協(xié)和醫(yī)院1999-2008年期間1906例住院的結(jié)腸癌

6、和直腸癌患者病歷資料，探討了近年來結(jié)腸癌和直腸癌發(fā)病模式的變遷，并初步分析其在臨床表現(xiàn)、實驗室檢查、確診方法、病變分期等的異同；同時選取了結(jié)腸癌和直腸癌手術(shù)石蠟組織標(biāo)本各30例，通過免疫組化的方法，檢測結(jié)直腸癌癌變過程中重要蛋白APC、Wnt1、β-catenin、p53、MLH1、PMS2、MSH2、MSH6的表達(dá)，切割和PCR測序的方法研究k-ras突變；在此基礎(chǔ)上，采用基因表達(dá)譜芯片技術(shù)分別檢測結(jié)腸癌和直腸癌各8例組織標(biāo)本，探討兩

7、者癌變相關(guān)基因表達(dá)的差異。
　　 研究結(jié)果：
　　 臨床資料分析表明，1999年～2008年期間結(jié)直腸癌收治比較80年代均明顯增加(1.39％vs0.97%p＜0.05)，但結(jié)腸癌和直腸癌分別增加幅度無明顯差異；40以下年輕患者近10年呈下降趨勢，而70歲以上的患者有所增加，其中以直腸癌的變化更有統(tǒng)計學(xué)差異(p＜0.05)；直腸癌出現(xiàn)便血和大便習(xí)慣改變的幾率高于結(jié)腸癌，分別為76.9%vs31.7%和71.9%vs33.

8、9%(p＜0.01)；結(jié)腸癌大便常規(guī)檢查異常明顯低于直腸癌(36.5%vs76.6%p＜0.01)，血紅蛋白下降在結(jié)腸癌中更為多見(40.9%vs29.2%p＜0.01)，CEA檢查異常在結(jié)腸癌中更為常見(57.9%vs31.1%p＜0.01)；直腸指診發(fā)現(xiàn)直腸癌的陽性率高達(dá)87.9%，結(jié)腸鏡檢查直腸癌合并息肉的人數(shù)少于結(jié)腸癌(35.7%vs19.7%p＜0.01)，病理分期均以中晚期為主。免疫組織化學(xué)檢測表明，結(jié)腸癌和直腸癌組APC蛋

9、白表達(dá)缺失的比例分別為40.0%和46.7%，Wnt1蛋白陽性表達(dá)的比例分別為50.0%和66.7%，雖直腸癌表達(dá)偏高，但無統(tǒng)計學(xué)差異，β-catenin陽性表達(dá)均在90%以上，p53陽性表達(dá)在直腸癌為86.7%，高于結(jié)腸癌的76.7%，但無統(tǒng)計學(xué)差異；MLH1、PMS2、MSH2、MSH6在結(jié)腸癌和直腸癌組織中的檢測發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸癌中有8例出現(xiàn)表達(dá)缺失，占26.7%，而直腸癌僅為4例，占13.3%(p＜0.01);4種蛋白缺失情況表明，無

10、一例表現(xiàn)為單個蛋白的表達(dá)缺失，MLH1和PMS2蛋白同時缺失多見于結(jié)腸癌中(87.5%)，MSH2和MSH6蛋白同時缺失多見于直腸癌(100%)。K-ras基因突變在結(jié)腸癌和直腸癌中為53.3%和36.6%(p＜0.05)。表達(dá)譜基因芯片檢測數(shù)據(jù)表明結(jié)腸癌和直腸癌癌變過程中存在10余種基因表達(dá)的差異。
　　 結(jié)論：
　　 近來結(jié)腸癌和直腸癌的發(fā)病率呈明顯升高趨勢，發(fā)病年齡趨于老年化；結(jié)腸癌的臨床表現(xiàn)比較隱匿，貧血和CEA

11、異常主要見于結(jié)腸癌中，直腸癌較少合并結(jié)腸息肉，直腸指診是診斷直腸癌簡便易行的方法之一；癌變機(jī)制方面，Wnt信號途徑的激活在結(jié)腸癌和直腸癌癌變過程均起著重要作用，在直腸癌中Wnt途徑的激活與Wnt1信號蛋白高表達(dá)和APC基因突變關(guān)系更為密切；變異型p53蛋白表達(dá)在兩種腫瘤發(fā)生過程中均有著重要作用，結(jié)腸癌中K-ras基因突變明顯高于直腸癌；錯配修復(fù)基因突變導(dǎo)致的蛋白表達(dá)缺失在結(jié)腸癌中更為多見，主要以MLH1和PMS2突變?yōu)橹鳎蹦c癌主要為M