宮頸癌及上皮內(nèi)病變液基細(xì)胞中VEGF mRNA和Endostatin mRNA的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的：
　　 宮頸癌是全球危害女性健康的第二位腫瘤，其發(fā)生可從低級別上皮內(nèi)病變到高級別上皮內(nèi)病變。人乳頭瘤病毒感染被認(rèn)為是宮頸癌發(fā)生的最主要因素，然而僅有一少部分感染患者發(fā)展為宮頸癌，這意味著仍有其它因素參與宮頸癌的發(fā)生。血管生成是腫瘤增生、侵襲和轉(zhuǎn)移的基本過程，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)起著決定性的作用，而且越來越多的證據(jù)表明HPV癌蛋白也可以促進(jìn)腫瘤的血管生成和VEGF的表達(dá)。
　　 本研究的主要目的是評價腫瘤標(biāo)志

2、物VEGFmRNA和EndostatinmRNA在宮頸癌及上皮內(nèi)病變液基細(xì)胞中的診斷價值，并與細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)診斷結(jié)果進(jìn)行對比研究。
　　 方法：
　　 收集中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2010年12月至2011年6月門診及住院患者98例，其中：無上皮內(nèi)病變或惡性病變者30例，非典型鱗狀上皮細(xì)胞意義不明確者4例，非典型鱗狀上皮細(xì)胞不除外高級別鱗狀上皮內(nèi)病變者27例，低級別鱗狀上皮內(nèi)病變24例，高級別鱗狀上皮內(nèi)病變38例，鱗狀細(xì)

3、胞癌5例。所有病例均有組織病理學(xué)診斷結(jié)果。另隨機(jī)選取健康體檢者30例作為陰性對照。128例受試者年齡為21-80歲，平均45.3歲。
　　 1、液基細(xì)胞薄片的制備和判讀
　　 收集的液基細(xì)胞標(biāo)本經(jīng)梯度離心，收集有效細(xì)胞成分，經(jīng)全自動細(xì)胞制片儀制片和染色，由2名細(xì)胞學(xué)專家盲法判讀，余下標(biāo)本用于RNA提取。
　　 2、逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reveresetranscriptionpolymerasechainrea

4、ction，RT-PCR)擴(kuò)增及擴(kuò)增產(chǎn)物的分析
　　 (1)收集宮頸細(xì)胞標(biāo)本提取總RNA。
　　 (2)總RNA的反轉(zhuǎn)錄及VEGF和endostatin基因片段的擴(kuò)增。
　　 (3)8％聚丙烯酰胺凝膠電泳，銀染色觀察并分析結(jié)果。
　　 結(jié)果：
　　 1、VEGF-mRNA和Endostatin-mRNA在鱗癌中的表達(dá)水平明顯高于重度不典型增生(CINⅢ)或中度不典型增生(CINⅡ)中的表達(dá)水平(P

5、<0.05)；在重度不典型增生(CINⅢ)或中度不典型增生(CINⅡ)中的表達(dá)水平明顯高于輕度不典型增生(CINⅠ)中的表達(dá)水平(P<0.05)；在輕度不典型增生(CINⅠ)中的表達(dá)水平明顯高于炎癥或?qū)φ战M中的表達(dá)水平(P<0.01)。
　　 2、有14例宮頸癌病變細(xì)胞學(xué)呈假陰性結(jié)果，分別為9例高級別病變(HSIL)，1例低級別病變(LSIL)，3例ASC-H及1例NILM，而VEGF-mRNA均呈陽性表達(dá)。
　　 3、