二羥黃酮對中度創(chuàng)傷性腦損傷后小鼠皮層神經(jīng)元樹突的保護(hù).pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 1 0 級碩士學(xué)位論文二羥黃酮對中度創(chuàng)傷性腦損傷后小鼠皮層神經(jīng)元樹突的保護(hù)P r o t e c t i V ee f I ’e c t so f d i h y d r o x y n a V o n e o n n e u r o n a l d e n d r i t e si nc o r t e xa f ．t e rm o d e r a t et r a u m a t i c b r a i n i

2、n j u r y i nm i c e課題來源： I u P u I 自選課題學(xué)位申請人 趙姝導(dǎo)師姓名． 董為人，陳錦輝專業(yè)名稱 人體解剖與組織胚胎學(xué)培養(yǎng)類型 學(xué)術(shù)型培養(yǎng)層次 碩士所在學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院2 0 14 年3 月2 2 日印第安納波利斯．廣州摘要方法：課題采用9 ．1 0 周齡的c 5 7 B L ／6 雄性小鼠，對其進(jìn)行可控性皮層撞擊模型，將小鼠麻醉、固定、消毒后剪開頭項(xiàng)部皮膚，以前囟和后囟的連線、中縫和顳肌連線的交點(diǎn)為圓

3、心，2 m m 為半徑用牙科鉆鉆一個(gè)圈，在不傷及硬腦膜的前提下小心揭開顱帽；調(diào)整撞擊桿位置使其位于鉆開的圓圈正中，并接觸面垂直，設(shè)置速度為3 m ／s ，深度為1 ．O m m ，停留時(shí)間為O ．1 s ，此條件下的撞擊即可造成中度創(chuàng)傷性腦損傷，非手術(shù)組僅摘去顱帽，并不對皮層進(jìn)行撞擊；小鼠被隨機(jī)分成4 組，分別為非手術(shù)組、手術(shù)組、治療組和實(shí)驗(yàn)對照組，每組4只。造模后，分別于1 小時(shí)，2 4 小時(shí)，4 8 小時(shí)，7 2 小時(shí)給予治療組小鼠

4、腹腔注射二羥黃酮，由于二羥黃酮是以二甲基亞砜作為溶劑，而二甲基亞砜也被報(bào)道具有一定的神經(jīng)保護(hù)作用，因此我們給另一組小鼠注射二甲基亞砜作為實(shí)驗(yàn)對照組；最后一次注射2 4 小時(shí)后，取出小鼠的大腦，高爾基染色預(yù)處理后，用滑動(dòng)切片機(jī)切片，切片厚度為2 0 0 “m ；切片用高爾基染色法染色并在顯微鏡下觀察拍照，選取皮層損傷區(qū)域邊緣起2 m m 區(qū)域，對皮層I I 、I I I 層所有錐體神● ，+經(jīng)元樹突上串珠樣改變、樹突分支、樹突棘數(shù)目等進(jìn)行

5、計(jì)數(shù)；另一方面，從行為學(xué)上檢測二羥黃酮對腦損傷模型小鼠的作用。共計(jì)9 0 只小鼠被隨機(jī)分配成4個(gè)組，每組1 5 到2 4 只，滾筒實(shí)驗(yàn)分別在術(shù)前一天、術(shù)后三天、術(shù)后七天、術(shù)后十四天進(jìn)行，記錄小鼠在滾筒上停留的時(shí)間用于評估小鼠損傷后的運(yùn)動(dòng)功能；術(shù)后第三周，對小鼠進(jìn)行為期6 天的M o r r i s 水迷宮試驗(yàn)，包括5 天的學(xué)習(xí)評估和最后1 天的記憶評估，記錄找到平臺的時(shí)間、游泳速度、最后一天在平臺所在象限停留的時(shí)間等指標(biāo)用于評估小鼠損傷

6、后的學(xué)習(xí)記憶功能。一結(jié)果：l 、二羥黃酮對損傷后皮層神經(jīng)元樹突串珠樣改變的影響：在創(chuàng)傷性腦損傷后，皮層的錐體神經(jīng)元受到了損傷，不僅僅是單純的細(xì)胞死亡，存活下來的神經(jīng)元也受到了影響，出現(xiàn)了樹突串珠樣改變。但是在治療組，串珠樣改變的程度明顯減輕。計(jì)數(shù)結(jié)果表明，對照組僅有少量的串珠樣改變( 1 9 ．7 8 士3 ．7 ／m m ) ，而手術(shù)組的小鼠串珠樣改變數(shù)目明顯增多( 3 7 ．5 8 士3 ．1 9 ／m m ) ，接近于對照組的兩倍