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1、At11esissubmittedtoZhengzhouUhiVers時forthedegreeofDoctorTheEXpressionalChangesofAP4M1inOxygenGlucoseD印dVedHippocanlpalNeuronsanditsE艉cton創(chuàng)Ⅷ)Arec印tors缸’amcl【ingByJingZhangSupeⅣisor:Pro£GuangyaoShengPediatricsneFirstAfjfil
2、iatedHospitalNovember2014摘要氧糖剝奪后海馬神經元中AP4M1表達變化及其對_蝴PA受體運輸的調控作用摘要目的研究已證實銜接蛋白復合物_4(adaptorproteiIlCoInplex4,AP4)基因突變與家族性隱性遺傳性腦癱綜合征相關,且其“亞基基因(ad印torrelatedproteincompleX4,mu1submlit,AP4M1)的突變可引起腦發(fā)育缺陷而導致先天性痙攣性癱瘓(congellital
3、sp嬲tictehaple西a,CST)并模擬了谷氨酸介導的圍產期腦白質損傷,可能的機制為AP4M1介導的APMA受體的異常分布引起的。然而AP4M1在缺氧性腦損傷中的表達變化及可能通過何種途徑產生作用尚不明確,本課題的目的是研究AP4M1在損傷的神經元中表達量和分布的變化,以及AP4介導舢ⅢA受體運輸的分子機制。以期探尋缺氧缺血性腦損傷的新機制和防治的新策略。材料及方法本課題以原代培養(yǎng)的胎鼠海馬神經元為實驗材料,采用氧糖剝奪建立缺氧性
4、腦損傷的細胞模型,免疫熒光標記神經元特異性烯醇化酶(neuronspecij6iceIIalose,NSE)以確定培養(yǎng)細胞中神經元的純度。實驗分為正常對照組及氧糖剝奪組,RealtimePCR、west鋤blot及免疫比色分析檢測的時間點為氧糖剝奪后O、12以及24小時,細胞免疫熒光雙染色及免疫共沉淀檢測的時間點為氧糖剝奪后O小時。分別采用RealtimePCR及westenlblot方法檢測AP4M1和AMPARs的mI斟A及蛋白表達
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