鈣敏感受體對(duì)海馬神經(jīng)元細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷的作用.pdf

1、目的：探討鈣敏感受體(CaSR)在缺氧復(fù)氧條件下對(duì)海馬神經(jīng)元細(xì)胞的作用及其可能的機(jī)制。
　　方法：利用原代培養(yǎng)的新生大鼠腦內(nèi)的海馬神經(jīng)元細(xì)胞建立缺氧復(fù)氧損傷模型，采用隨機(jī)數(shù)字表法分成四組，分別為正常對(duì)照組、缺氧復(fù)氧組（H/R）、激動(dòng)劑處理（GdCl3）組、拮抗劑處理（NPS-2390）組。在倒置顯微鏡下觀察海馬神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量和細(xì)胞形態(tài)，同時(shí)，利用MTT法檢測(cè)神經(jīng)元細(xì)胞的存活情況。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)四個(gè)組的神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡率，應(yīng)用W

2、estern-blot法檢測(cè)神經(jīng)元細(xì)胞中CaSR，caspase-3，Bcl-2蛋白表達(dá)和細(xì)胞色素（Cyt C）釋放，同樣應(yīng)用Western-blot法檢測(cè)ERK和P38蛋白磷酸化水平。
　　結(jié)果：與對(duì)照組比較，H/R組的細(xì)胞數(shù)目顯著減少，與H/R組比較，GdCl3組細(xì)胞數(shù)量進(jìn)一步減少，而鈣敏感受體拮抗劑組的細(xì)胞數(shù)目有效增加。與對(duì)照組比較，H/R組及激動(dòng)劑處理（GdCl3）組中神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率明顯升高，細(xì)胞凋亡率在拮抗劑（NPS-

3、2390）組中顯著下降(P<0.05)。與對(duì)照組比較，H/R組及激動(dòng)劑處理（GdCl3）組細(xì)胞中caspase-3，BAX蛋白表達(dá)上調(diào)和細(xì)胞色素（Cyt C）釋放增多，與上兩組比較，拮抗劑（NPS-2390）組caspase-3，BAX蛋白表達(dá)減少和細(xì)胞色素（CytC）釋放減少(P<0.05)。在四組中，ERK1/2，P38和 pP38的表達(dá)沒有顯著差異，但是pERK1/2的表達(dá)在H/R組及激動(dòng)劑處理（GdCl3）組顯著增加，在拮抗劑（