雞腦生理活性物質(zhì)的制備.pdf

1、雞腦主要由蛋白質(zhì)和脂肪構(gòu)成。雞腦脂肪富含二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳四烯酸(AA)等功能性不飽和脂肪酸，是人體大腦高度不飽和脂肪酸的主要組成成分，是很優(yōu)質(zhì)的功能性不飽和脂肪酸資源；而以腦蛋白為原料、以腦活素為技術(shù)背景，生產(chǎn)氨基酸和生物活性肽的混合體，具有特殊的生理功能，具有很高的開發(fā)價(jià)值。 本研究采用丙酮和石油醚提取雞腦脂肪，使雞腦脂肪與雞腦蛋白得到分離，再用丙酮萃取雞腦脂肪中的脂肪酸，然后用低溫冷卻與尿素包合相結(jié)合的方法對(duì)

2、不飽和脂肪酸進(jìn)行濃縮。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明先用丙酮和石油醚混合溶劑在體積比1∶2、溫度70℃、時(shí)間2h的條件下提取雞腦脂肪，再用3倍丙酮于常溫下萃取其中的脂肪酸3次，每次10min，脂肪酸得率可達(dá)2.2﹪。然后用低溫冷卻與尿素包合相結(jié)合的方法濃縮不飽和脂肪酸，其最佳工藝條件為：先90℃皂化75min，然后-20℃冷卻18h，再以尿素與脂肪酸之比1∶2，包合溫度80℃，時(shí)間2h的條件下進(jìn)行反應(yīng)，最后在-10℃條件下靜置過夜，不飽和脂肪酸產(chǎn)率為0.

3、09﹪，脂肪酸的碘值由30.24提高到118.12。經(jīng)過氣相色譜測定：發(fā)現(xiàn)很多功能性不飽和脂肪酸含量得到了明顯的提高，其中二十二碳六烯酸(DHA)從1.5﹪提高到5.5﹪，二十碳四烯酸(AA)從7.5﹪提高到10.0﹪。 將得到的雞腦蛋白選用胃蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶水解。采用單酶、雙酶水解工藝，以水解度、氮溶指數(shù)、游離氨基酸、低分子肽為指標(biāo)，通過正交試驗(yàn)得到最佳水解條件：先用中性蛋白酶于50℃，pH8.5，加酶量0.8U/

4、mg，底物濃度為0.5﹪，水解4h，后用胃蛋白酶于40℃，pH1.0，加酶量8U/mg，水解3h。在該條件下，肽得率為70.38﹪，水解產(chǎn)物的氨基酸含量為2.01﹪，10kD分子量以下的肽含量為47.72﹪，3kD分子量以下的肽含量為40.14﹪，1kD分子量以下的肽含量為29.03﹪。對(duì)中性蛋白酶和胃蛋白酶的雙酶水解產(chǎn)物以及經(jīng)超濾得到的1kD分子量以下的水解產(chǎn)物進(jìn)行肽譜檢測，其主峰保留時(shí)間與腦活素標(biāo)準(zhǔn)品一致。 本文的雞腦脂肪酸