電針改善不同年齡段大鼠創(chuàng)傷應(yīng)激致免疫抑制的酪氨酸蛋白激酶Fyn機(jī)制.pdf

1、應(yīng)激或應(yīng)激反應(yīng)是指機(jī)體在受到各種強(qiáng)烈因素（應(yīng)激源）刺激時(shí)所出現(xiàn)的非特異性全身反應(yīng)。應(yīng)激作為一種強(qiáng)烈刺激能通過影響下丘腦—垂體—腎上腺軸(HPA軸)及交感神經(jīng)系統(tǒng)的活動(dòng)，從而改變機(jī)體的免疫狀態(tài)。下丘腦—垂體—腎上腺軸及交感神經(jīng)系統(tǒng)主要通過神經(jīng)遞質(zhì)、激素、細(xì)胞因子等介導(dǎo)到免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)中，例如糖皮質(zhì)激素、腎上腺素、去甲腎上腺素、胰高血糖素、白介素-1、內(nèi)啡肽等，它們通過作用于免疫細(xì)胞上相應(yīng)的受體對(duì)其功能起到不同的調(diào)節(jié)作用。應(yīng)激通過“神經(jīng)—內(nèi)

2、分泌—免疫”網(wǎng)絡(luò)，給機(jī)體各系統(tǒng)的功能帶來(lái)一系列改變。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，前額皮層、海馬、下丘腦已被證實(shí)是與應(yīng)激密切相關(guān)的腦區(qū)，參與到應(yīng)激過程中對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。外科手術(shù)作為一種臨床常見的診療手段，也作為一個(gè)應(yīng)激源，在治療的同時(shí)也影響了免疫系統(tǒng)的功能。臨床上發(fā)現(xiàn)重大外科手術(shù)產(chǎn)生的應(yīng)激可引起機(jī)體免疫功能受抑制。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的創(chuàng)傷應(yīng)激也成功誘導(dǎo)了大鼠的免疫抑制。另外，臨床上中老年人在面對(duì)手術(shù)帶來(lái)的創(chuàng)傷時(shí)，免疫功能所受到的影響更為明顯，恢復(fù)時(shí)間延長(zhǎng)，

3、并發(fā)感染的機(jī)會(huì)明顯提高，嚴(yán)重時(shí)甚至威脅生命。如何提高機(jī)體的免疫功能、尤其是找尋加快中老年人術(shù)后恢復(fù)的手段，對(duì)于更好的開展臨床疾病手術(shù)治療具有重要的意義。
　　針刺治療作為我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的一個(gè)重要分支，具有悠久的歷史，并且具有安全、有效、簡(jiǎn)便、副作用極少的優(yōu)點(diǎn)。電針對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)已經(jīng)受到越來(lái)越多的關(guān)注，針灸調(diào)節(jié)免疫的關(guān)鍵是“扶正固本”，其調(diào)節(jié)作用已經(jīng)得到了很多臨床試驗(yàn)的驗(yàn)證。針刺對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用包括對(duì)淋巴細(xì)胞、外周血白細(xì)胞、單核

4、巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞的數(shù)量、活性及功能等方面的改善。本實(shí)驗(yàn)室前期工作中也證實(shí)創(chuàng)傷應(yīng)激后，脾臟淋巴細(xì)胞增殖能力、NK細(xì)胞活性及IL-2的產(chǎn)生明顯下降，術(shù)后單次電針對(duì)以上免疫抑制狀態(tài)有明顯的改善作用。在臨床上針灸的保健作用已得到證實(shí)，長(zhǎng)期規(guī)律施以針刺對(duì)于中老年人具有免疫調(diào)節(jié)作用。我們采用術(shù)后單次電針或術(shù)前多次電針結(jié)合術(shù)后單次電針這兩種不同治療方式，因此，本研究比較了電針免疫調(diào)節(jié)的年齡相關(guān)差異性，并探討電針調(diào)節(jié)免疫功能的機(jī)制。
　　Src

5、蛋白激酶屬于非受體酪氨酸蛋白激酶家族，主要包括8種高度同源的蛋白c-Src、 Fyn、Yes、Lck、Lyn、 Hck、 Fgr和Blk，是胞內(nèi)重要的信號(hào)分子之一，主要通過調(diào)節(jié)蛋白酪氨酸磷酸化，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化、遷移和細(xì)胞形態(tài)的維持，同時(shí)也參與T細(xì)胞受體的激活。因此，在外周免疫系統(tǒng)及細(xì)胞活動(dòng)中發(fā)揮重要的作用。c-Src、Fyn、Yes在中樞神經(jīng)系統(tǒng)大量表達(dá)。在下丘腦部位Fyn相關(guān)蛋白的激活能影響大鼠攝食及能量代謝。在海馬部位，F(xiàn)y

6、n參與突觸的可塑性，與海馬結(jié)構(gòu)的完整性密切相關(guān)，在學(xué)習(xí)記憶過程中發(fā)揮重要作用。Fyn還參與到大腦皮層構(gòu)建，并且與衰老相關(guān)神經(jīng)元回路的重塑密切相關(guān)。提示Fyn在應(yīng)激相關(guān)腦區(qū)均發(fā)揮重要作用并且與衰老相關(guān)。ERK1/2是Src蛋白激酶信號(hào)通路的主要組成部分之一，F(xiàn)yn能通過G蛋白偶聯(lián)受體以及生長(zhǎng)因子受體激活下游ERK1/2，因此Fyn—ERK1/2作為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)交互激活的重合點(diǎn)參與到多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。Src蛋白激酶家族及其下游ERK1/2信號(hào)轉(zhuǎn)

7、導(dǎo)通路也被證明參與神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)，能夠改善由于應(yīng)激或嗎啡依賴、戒斷導(dǎo)致的免疫抑制。因此Fyn—ERK1/2信號(hào)通路是本論文關(guān)注的重點(diǎn)，著力探討這一通路在神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)及電針調(diào)節(jié)中的作用。
　　Src家族激酶可被上游許多信號(hào)分子激活，包括NMDA受體、生長(zhǎng)因子受體、G蛋白偶聯(lián)受體和鈣離子等。TrkB是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體的一種，目前已知它的特異性配體包括腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子BDNF和NT4/5。Fyn對(duì)各類生長(zhǎng)因子受體的磷酸化作用已被證實(shí)，它

8、同樣參與不同條件下TrkB的激活:在BDNF存在的情況下Fyn能易化BDNF誘導(dǎo)的TrkB激活;在G蛋白偶聯(lián)受體的介導(dǎo)下，F(xiàn)yn能在神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子BDNF缺失的條件下激活TrkB;而在Zn2+激活TrkB的過程中，Src和Fyn的參與是必要條件。BDNF或Zn2+均能首先使TrkB的Tyr-705/706位點(diǎn)磷酸化而Fyn則進(jìn)一步參與到TrkB Tyr-515位點(diǎn)的磷酸化過程中?？梢姡現(xiàn)yn既能協(xié)同G蛋白偶聯(lián)受體或Zn2+作為上游信號(hào)激活

9、TrkB，亦可在TrkB激活的狀態(tài)下作為下游分子進(jìn)一步放大激活信號(hào)。不同形式的TrkB激活均能調(diào)節(jié)下丘腦CRH的表達(dá)，這使Fyn能通過介導(dǎo)TrkB的激活參與到HPA軸的調(diào)控中。Fyn作為一個(gè)具有豐富上下游的信號(hào)分子，其復(fù)雜的可調(diào)控性使其更有可能承接針刺調(diào)節(jié)的復(fù)雜節(jié)點(diǎn)。本課題試圖從中樞神經(jīng)系統(tǒng)中可能介導(dǎo)了神經(jīng)保護(hù)的信號(hào)分子Fyn入手，并通過對(duì)其上下游信號(hào)分子的探討，觀察它在應(yīng)激免疫調(diào)節(jié)中的作用，并進(jìn)一步探討電針對(duì)創(chuàng)傷應(yīng)激介導(dǎo)免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)

10、機(jī)制。
　　綜上所述，本研究擬在不同年齡段大鼠創(chuàng)傷應(yīng)激模型上:(1)通過淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能的檢測(cè)及自然殺傷(NK)細(xì)胞活性檢測(cè)觀察創(chuàng)傷應(yīng)激對(duì)不同年齡段大鼠免疫功能的影響，并評(píng)估單次或多次電針治療對(duì)不同年齡段創(chuàng)傷應(yīng)激大鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用，觀察不同年齡段大鼠電針療效的差異性;(2)針對(duì)應(yīng)激相關(guān)的腦區(qū)即前額皮層、海馬、下丘腦部位，通過免疫組織化學(xué)、蛋白免疫印跡等分子生物學(xué)方法觀察大鼠創(chuàng)傷應(yīng)激后腦內(nèi)Fyn/NeuN共表達(dá)細(xì)胞的變化及下游p

11、ERK1/2的變化，并觀察電針調(diào)節(jié)過程中出現(xiàn)的改變;(3)調(diào)控腦內(nèi)Fyn或下游pERK1/2的表達(dá)，觀察創(chuàng)傷應(yīng)激大鼠免疫功能的變化，明確Fyn及下游pERK1/2的免疫調(diào)節(jié)作用;(4)針對(duì)應(yīng)激相關(guān)的腦區(qū)即前額皮層、海馬、下丘腦部位，通過免疫組織化學(xué)、蛋白免疫印跡等分子生物學(xué)方法觀察大鼠創(chuàng)傷應(yīng)激后Fyn/TrkB共表達(dá)細(xì)胞，BDNF的表達(dá)變化，以及不同磷酸化位點(diǎn)TrkB的表達(dá)變化，并觀察電針調(diào)節(jié)過程中出現(xiàn)的改變;通過體外實(shí)驗(yàn)，在原代培養(yǎng)的

12、神經(jīng)元中觀察酪氨酸蛋白激酶抑制劑PP2對(duì)BDNF誘導(dǎo)不同磷酸化位點(diǎn)TrkB的表達(dá)影響，進(jìn)一步探討Fyn對(duì)TrkB的調(diào)節(jié)機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1.創(chuàng)傷應(yīng)激對(duì)不同年齡段大鼠免疫功能的影響以及電針的調(diào)節(jié)作用
　　1月齡與12月齡大鼠各自隨機(jī)分為:對(duì)照組（無(wú)創(chuàng)傷應(yīng)激組T0），創(chuàng)傷應(yīng)激1天組(T1)，創(chuàng)傷應(yīng)激3天組(T3)，創(chuàng)傷應(yīng)激7天組(T7)。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能的檢測(cè)及自然殺傷(NK)細(xì)胞活性檢測(cè)的結(jié)果表明，不同年齡

13、段的大鼠在給予創(chuàng)傷應(yīng)激造模后，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能以及NK細(xì)胞活性均明顯下降。免疫活性在創(chuàng)傷后1天達(dá)到最低，3天時(shí)可以觀察到恢復(fù)的趨勢(shì)，到了創(chuàng)傷后第7天基本恢復(fù)正常。兩個(gè)年齡段大鼠相比，12月齡的大鼠免疫抑制程度低、持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)，且7天后未見完全恢復(fù)，與正常水平相比仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　1月齡與12月齡大鼠各自隨機(jī)分為:對(duì)照組(無(wú)創(chuàng)傷應(yīng)激組T0)，創(chuàng)傷應(yīng)激1天組(T1)，創(chuàng)傷應(yīng)激+單次電針治療組(T1+SEA)，創(chuàng)傷應(yīng)激+多次電針治療

14、組(T1+MEA)，創(chuàng)傷應(yīng)激+單次假電針組(T1+sham SEA)，創(chuàng)傷應(yīng)激+多次假電針組（T1+sham MEA）。其中，單次電針為術(shù)后即刻給予一次電針，多次電針為術(shù)前14次隔日電針結(jié)合術(shù)后即刻電針。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能的檢測(cè)及自然殺傷(NK)細(xì)胞活性檢測(cè)的結(jié)果表明，單次或多次電針治療對(duì)不同年齡段創(chuàng)傷應(yīng)激大鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用具有差異性。不同年齡段大鼠通過單次電針治療后免疫活性均有不同程度的改善，1月齡大鼠在給予單次電針治療后，淋巴細(xì)胞

15、轉(zhuǎn)化功能及自然殺傷(NK)細(xì)胞活性的提高較對(duì)照組有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，相比較而言12月齡大鼠在單次電針治療后免疫活性有所恢復(fù)但并未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。然而，術(shù)前多次電針加術(shù)后單次電針能明顯促進(jìn)12月齡大鼠創(chuàng)傷應(yīng)激后免疫抑制的恢復(fù)。但多次電針相較單次電針，對(duì)于1月齡大鼠并未起到更好的調(diào)節(jié)作用。而單次或多次假電針均未起到明顯的免疫調(diào)節(jié)作用。
　　2.不同年齡段大鼠創(chuàng)傷應(yīng)激后腦內(nèi)Fyn/NeuN共表達(dá)細(xì)胞及下游ERK1/2的變化并觀察電針調(diào)節(jié)過

16、程中出現(xiàn)的改變
　　實(shí)驗(yàn)分組同1，在前額皮層、海馬CA3/DG區(qū)、下丘腦室旁核(PVN)，通過免疫熒光雙標(biāo)，我們觀察到腦內(nèi)Fyn/NeuN共表達(dá)的細(xì)胞在免疫抑制的恢復(fù)過程中呈現(xiàn)增加的趨勢(shì)，及創(chuàng)傷應(yīng)激1天后Fyn/NeuN共表達(dá)的細(xì)胞開始增加，3天后Fyn/NeuN共表達(dá)的細(xì)胞數(shù)量到達(dá)最大值，7天后共表達(dá)的細(xì)胞數(shù)量基本恢復(fù)到創(chuàng)傷應(yīng)激前的水平。Fyn/NeuN的共表達(dá)趨勢(shì)在不同年齡段大鼠中是有差距的，在整個(gè)創(chuàng)傷應(yīng)激恢復(fù)階段，12月齡大

17、鼠共表達(dá)細(xì)胞數(shù)量較1月齡的大鼠少，創(chuàng)傷應(yīng)激7天后12月齡大鼠Fyn/NeuN共表達(dá)細(xì)胞尚未恢復(fù)到創(chuàng)傷應(yīng)激前的水平，較對(duì)照組仍有較高水平的表達(dá)。創(chuàng)傷應(yīng)激后不同年齡段大鼠前額皮質(zhì)的p-ERK1/2的表達(dá)均有不同程度的升高。創(chuàng)傷應(yīng)激1天后p-ERK1/2的表達(dá)開始增加，3天后p-ERK1/2的表達(dá)到達(dá)峰值。與月齡1月大鼠相比較月齡12月大鼠在創(chuàng)傷應(yīng)激恢復(fù)過程中p-ERK1/2的表達(dá)整體減少。創(chuàng)傷應(yīng)激后p-ERK1/2的變化趨勢(shì)與Fyn在創(chuàng)傷后

18、的表達(dá)一致。但7天后p-ERK1/2的表達(dá)在各年齡段大鼠中均未恢復(fù)到創(chuàng)傷應(yīng)激前水平。
　　電針治療后在前額皮層、海馬CA3/DG區(qū)、下丘腦室旁核(PVN)，通過免疫熒光雙標(biāo)，我們觀察到單次電針能不同程度的提高不同年齡段大鼠Fyn/NeuN共表達(dá)的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量。在單次電針治療后1月齡大鼠較12月齡大鼠Fyn/NeuN共表達(dá)的細(xì)胞增加更為顯著。然而，多次電針較單次電針治療能夠顯著提高12月齡大鼠Fyn/NeuN共表達(dá)的細(xì)胞數(shù)量，但多次

19、電針較單次電針相比并未能在1月齡大鼠上進(jìn)一步提高Fyn/NeuN共表達(dá)細(xì)胞數(shù)。而單次或多次假電針均不能明顯的提高Fyn/NeuN共表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量。電針同樣能提高Fyn下游pERK1/2的表達(dá)，pERK1/2表達(dá)量的變化與Fyn的表達(dá)變化一致。
　　3.中樞調(diào)控Fyn及ERK1/2參與到創(chuàng)傷應(yīng)激誘導(dǎo)免疫抑制的恢復(fù)
　　兩個(gè)年齡段大鼠各自隨機(jī)分為:對(duì)照組（無(wú)創(chuàng)傷應(yīng)激組T0），創(chuàng)傷應(yīng)激3天組(T3)，創(chuàng)傷應(yīng)激3天+FynAnti

20、body(T3+FynAb)，創(chuàng)傷應(yīng)激3天+active Fyn(T3+ active Fyn)，創(chuàng)傷應(yīng)激3天+PD98059(T3+ PD98059)，創(chuàng)傷應(yīng)激3天+U0126(T3+ U0126)，創(chuàng)傷應(yīng)激3天+PD98059& active Fyn(T3+ PD98059& activeFyn)。
　　以Fyn為調(diào)控點(diǎn)，在Fyn表達(dá)最量最多的創(chuàng)傷應(yīng)激后第三天為時(shí)間節(jié)點(diǎn)，在不同年齡段創(chuàng)傷應(yīng)激大鼠通過側(cè)腦室給予有活性的Fyn c

21、DNA腺病毒以及Fyn抗體，我們觀察到，上調(diào)腦內(nèi)Fyn的表達(dá)不同年齡段大鼠的淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化功能及自然殺傷細(xì)胞活性均有提高。相反的，下調(diào)腦內(nèi)Fyn的表達(dá)，不同年齡段大鼠的淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化功能及NK細(xì)胞活性均下降。通過進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)在上調(diào)腦內(nèi)Fyn表達(dá)的同時(shí)通過給予Fyn下游信號(hào)通路ERK1/2的抑制劑，F(xiàn)yn提高免疫活性的趨勢(shì)受到一定程度抑制。在單獨(dú)給予ERK1/2抑制劑時(shí)，不同年齡段大鼠的免疫活性也受到抑制。
　　4.大鼠創(chuàng)傷應(yīng)激后Fy

22、n/TrkB共表達(dá)細(xì)胞數(shù)量、BDNF的表達(dá)變化、以及不同磷酸化位點(diǎn)TrkB的表達(dá)變化以及電針調(diào)節(jié)過程中出現(xiàn)的改變
　　實(shí)驗(yàn)分組同1，在前額皮層、海馬CA3/DG區(qū)、下丘腦室旁核(PVN)，通過免疫熒光雙標(biāo)，我們觀察到創(chuàng)傷應(yīng)激后不同年齡段大鼠腦內(nèi)Fyn/TrkB共表達(dá)的細(xì)胞在免疫抑制的恢復(fù)過程中呈現(xiàn)增加的趨勢(shì)，及創(chuàng)傷應(yīng)激1天后Fyn/TrkB共表達(dá)的細(xì)胞開始增加，3天后Fyn/TrkB共表達(dá)的細(xì)胞數(shù)量到達(dá)峰值，7天后共表達(dá)的細(xì)胞數(shù)量

23、基本恢復(fù)到創(chuàng)傷應(yīng)激前的水平。Fyn/TrkB的共表達(dá)趨勢(shì)在不同年齡段大鼠中是有差距的，在整個(gè)創(chuàng)傷應(yīng)激恢復(fù)階段，月齡12月齡大鼠共表達(dá)細(xì)胞數(shù)量較1月齡的大鼠少，創(chuàng)傷應(yīng)激7天后12月齡大鼠Fyn/TrkB共表達(dá)細(xì)胞尚未恢復(fù)到創(chuàng)傷應(yīng)激前的水平，較對(duì)照組仍有較高水平的表達(dá)。Fyn/TrkB共表達(dá)的細(xì)胞數(shù)量變化趨勢(shì)與Fyn/NeuN共表達(dá)的細(xì)胞一致。且與Fyn共標(biāo)的TrkB陽(yáng)性細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生了變化，熒光信號(hào)出現(xiàn)了集中和增強(qiáng)。電針治療后在前額皮層、

24、海馬CA3/DG區(qū)、下丘腦室旁核(PVN)，通過免疫熒光雙標(biāo)，我們觀察到單次電針能不同程度的提高不同年齡段大鼠Fyn/TrkB共表達(dá)的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量。在單次電針治療后1月齡大鼠較12月齡大鼠Fyn/TrkB共表達(dá)的細(xì)胞增加更為顯著。然而，多次電針較單次電針治療能夠顯著提高12月齡大鼠Fyn/TrkB共表達(dá)的細(xì)胞數(shù)量，但多次電針較單次電針相比并未能在1月齡大鼠上進(jìn)一步明顯提高Fyn/TrkB共表達(dá)細(xì)胞數(shù)。而單次或多次假電針均不能明顯的提高F

25、yn/TrkB共表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量。
　　下丘腦p-TrkB（Tyr-705/706）和p-TrkB(Tyr-515)在創(chuàng)傷應(yīng)激后均有不同程度的升高，創(chuàng)傷應(yīng)激后第三天到達(dá)峰值，1月齡大鼠組p-TrkB（Tyr-515）在創(chuàng)傷應(yīng)激后第7天基本恢復(fù)正常水平，但p-TrkB(Tyr-705/706)表達(dá)較對(duì)照組仍略有提高。12月齡大鼠組的p-TrkB（Tyr-705/706）和p-TrkB(Tyr-515)表達(dá)水平在創(chuàng)傷應(yīng)激后第7天均未恢

26、復(fù)至對(duì)照組水平。單次電針或多次電針均能引起創(chuàng)傷應(yīng)激后不同年齡段大鼠下丘腦p-TrkB（Tyr-705/706）和p-TrkB(Tyr-515)表達(dá)增多。多次電針較單次電針在12月齡大鼠上更顯著的提高了p-TrkB(Tyr-515)的表達(dá)。
　　免疫組織化學(xué)DAB染色發(fā)現(xiàn)創(chuàng)傷應(yīng)激后皮層、海馬、下丘腦BDNF陽(yáng)性細(xì)胞出現(xiàn)空泡現(xiàn)象，而BDNF蛋白免疫印跡結(jié)果表示BDNF蛋白量并未出現(xiàn)明顯變化。提示創(chuàng)傷應(yīng)激后Fyn/TrkB激活可能存在其

27、他機(jī)制。
　　5.Src激酶抑制劑PP2在原代培養(yǎng)神經(jīng)元中對(duì)TrkB磷酸化的作用
　　胎鼠皮層神經(jīng)元原代培養(yǎng)后分為三組:對(duì)照組，BDNF給藥組，PP2+BDNF給藥組。
　　通過蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)BDNF能顯著誘導(dǎo)TrkB Tyr-705/706及Tyr-515位點(diǎn)的磷酸化，提前1h PP2預(yù)處理能部分逆轉(zhuǎn)BDNF誘導(dǎo)的TrkBTyr-705/706位點(diǎn)的磷酸化，并能完全抑制TrkB Tyr-515位點(diǎn)的磷酸化

28、。
　　綜上所述，本論文獲得以下結(jié)論:
　　1.創(chuàng)傷應(yīng)激能誘導(dǎo)不同年齡段大鼠的免疫抑制，12月齡大鼠較1月齡大鼠免疫抑制更為明顯，且恢復(fù)時(shí)程延長(zhǎng)。不同的電針給予方式針對(duì)不同年齡段大鼠其調(diào)節(jié)作用具有年齡相關(guān)的差異性。
　　2.Fyn及下游的pERK1/2參與到創(chuàng)傷應(yīng)激大鼠免疫抑制的恢復(fù)過程中，并且與電針的調(diào)節(jié)效應(yīng)相關(guān)。神經(jīng)元可能是創(chuàng)傷應(yīng)激及電針免疫調(diào)節(jié)過程中的重要細(xì)胞類型。
　　3.創(chuàng)傷應(yīng)激后TrkB在不同年齡段表