蕎麥芽的抗突變、抗腫瘤生理活性研究.pdf

1、目的：
　　蕎麥在我國種植的歷史十分悠久,特別是蕎麥由我國引入日本后,日本人就已視蕎麥為一種重要的功能性食品。蕎麥的營養(yǎng)價值豐富，其蛋白質(zhì)、維生素、脂肪及其他成分的含量遠遠高于一些大宗雜糧作物，但是由于蕎麥芽籽粒中胰蛋白酶抑制劑等高活性的抗營養(yǎng)因子的存在，使蕎麥的蛋白質(zhì)很難得到消化利用，而且有時會有不適應癥狀的產(chǎn)生。發(fā)芽可以提高蕎麥的營養(yǎng)價值和功能特性，同時蕎麥芽具有口感良好、營養(yǎng)豐富、無過敏性反應等優(yōu)點。本論文對蕎麥芽的抗突變、

2、抗腫瘤生理活性進行研究，為繼續(xù)開發(fā)蕎麥芽的保健作用提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.為研究蕎麥芽的抗氧化活性，本試驗以不同生長階段的蕎麥芽為研究對象，采用70％乙醇為溶劑提取了不同生長階段甜蕎麥芽和苦蕎麥芽的總黃酮,利用比色法測定了蕎麥芽提取物對DPPH自由基的清除率。
　　2.以不同萌發(fā)期的黒豐一號、甜蕎麥芽和壩上苦蕎為試驗對象，利用高效液相色譜法（HPLC），對萌發(fā)過程中蕎麥芽中蘆丁的變化情況進行測定，并對萌發(fā)蕎

3、麥芽的醛糖還原酶（rAR）的作用效果和蕎麥芽的ABTS自由基的清除作用進行試驗,根據(jù)效果確定蕎麥芽的最佳萌發(fā)期。
　　3.利用最佳萌發(fā)期的苦蕎麥芽用乙醇、氯仿，乙酸乙酯,正丁醇和水進行提取，采用改良的Ames試驗方法、小鼠骨髓細胞微核試驗觀察蕎麥芽不同提取部位的抗突變性，利用磺基羅丹明B染色法（SRB法）、小鼠S-180移植性腫瘤方法對蕎麥芽不同極性提取部位抑制腫瘤細胞生長效果，對蕎麥芽的抗突變、抗腫瘤有效成分及其機制進行研究，為

4、繼續(xù)開發(fā)蕎麥芽的保健作用提供理論依據(jù)。
　　結果：
　　1.不同品種的蕎麥芽均有一定的抗氧化能力，且苦蕎的抗氧化能力明顯高于甜蕎。苦蕎麥芽在萌發(fā)的第10天時對DPPH自由基的清除能力最高，清除率達到80%以上，甜蕎麥芽在萌發(fā)的第8天時清除率達50%以上，以后幾天略有下降。
　　2. HPLC圖譜可知苦蕎和甜蕎中的蘆丁含量都伴隨著萌發(fā)的進行而有不同程度的提升；苦蕎麥芽黒豐一號的ABTS自由基清除的最佳效果達是在萌發(fā)的第1

5、0天，試驗結果低于對照物Trolox的值，但卻明顯比蘆丁標準品的作用效果要高；萌發(fā)第10天時的壩上苦蕎麥芽對rAR作用效果達最大值，作用結果明顯比蘆丁標準品、槲皮素要高。
　　3.抗突變試驗中：萌發(fā)的蕎麥芽乙酸乙酯提取物（200μg/皿）對N-甲基-N-硝基-N-亞硝基胍(MNNG)誘導的沙門氏菌TA98顯示了80.6%的抗突變效果，同時乙酸乙酯提取物與其他提取物相比，對4-硝基喹啉-1-氧化物（4NQQ）、3-氨基-1,4-二甲

6、基-5H-吡啶并[4,3-b]吲哚（Trp-P-1）處理的TA98和TA100顯示了更高的抗突變效果，且結果呈現(xiàn)一定的劑量-效應關系；蕎麥芽提取物對MNNG誘發(fā)的小鼠骨髓細胞微核的發(fā)生有明顯的抑制效果，其中蕎麥芽乙醇提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物在80 mg/kg濃度下，對小鼠骨髓微核的抑制率達73.4%，75.8%，74.2%。
　　4.體外抗腫瘤試驗：蕎麥芽乙酸乙酯和正丁醇提取物對腫瘤細胞的生長具有較高的抑制效果。萌發(fā)第

7、10天的苦蕎麥芽在濃度為1.0 mg/mL時，乙酸乙酯提取物對胃癌細胞（AGS）、肺癌細胞（A549）、乳腺癌細胞（MCF-7）、肝癌細胞（Hep3B）、結腸癌細胞（Colo205）抑制活性分別為94.8、70.3、79.6、82.3、73.2%。體內(nèi)抗腫瘤試驗：對小鼠S-180移植性腫瘤生長也有明顯的抑制作用，其中蕎麥芽乙醇提取物、乙酸乙酯提取物的抑瘤率達39.5%、38.0%。
　　結論：
　　1.不同品種的蕎麥芽苗均有

8、一定的抗氧化能力，且苦蕎比甜蕎的抗氧化能力明顯要高。
　　2.苦蕎和甜蕎中的蘆丁含量都伴隨著萌發(fā)的進行而有不同程度的提升，苦蕎麥芽中蘆丁含量略高于甜蕎麥芽。萌發(fā)第10天的壩上苦蕎麥芽具有較好的清除自由基作用效果，同時對rAR抑制效果也很明顯。
　　3.萌發(fā)第10天的壩上苦蕎麥芽不同提取部位均具有一定的抗突變性，其乙酸乙酯提取物的抗突變效果最好。
　　4.萌發(fā)第10天的壩上苦蕎麥芽不同提取部位對體細胞DNA損傷有保護作用