行瘀降糖膠囊的制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究.pdf

1、第一部分行瘀降糖膠囊制備工藝研究
　　目的:本研究以2010版藥典為依據(jù)，利用正交試驗(yàn)和高效液相法，篩選行瘀降糖膠囊的最佳制備工藝。
　　方法:采取部分煎煮，部分生藥粉入藥的方法。將濃縮液與生藥粉混勻后，再干燥粉碎的方法進(jìn)行制備。
　　1粉碎工藝:為避免有效成分流失，充分發(fā)揮藥效，并參考文獻(xiàn)后確定將部分黃連、大黃、部分麩炒山藥粉碎入藥。
　　2提取工藝:根據(jù)各個(gè)藥的功效及用法，確定部分黃連、桑白皮、知母、茯苓、澤

2、瀉、枳實(shí)、麩炒山藥、紅花、川牛膝等藥物入湯劑，進(jìn)行水煎提取。在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以水為提取溶劑，以加水倍數(shù)(A)、提取時(shí)間(B)及提取次數(shù)(C)為考察因素，每個(gè)因素設(shè)3個(gè)水平，選用L9(34)表進(jìn)行正交試驗(yàn)，以干膏得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，篩選最佳工藝。
　　3鹽酸小檗堿含量測(cè)定:將正交試驗(yàn)中的9個(gè)樣品的干膏加甲醇5ml使溶解分別作為9個(gè)供試品，另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。分別取對(duì)照品溶液、供試

3、品溶液各10μL，注入液相色譜儀，進(jìn)行分析，得相應(yīng)的色譜圖，比較各色譜圖。驗(yàn)證干膏得率與鹽酸小檗堿含量的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1粉碎工藝
　　將1/3處方量黃連、全部量的大黃、1/2處方量麩炒山藥烘干研細(xì)過60目篩。
　　2正交試驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)出膏率的影響由大到小依次為:提取次數(shù)＞提取時(shí)間＞加水量。不同提取次數(shù)(F=156.91)和不同提取時(shí)間(F=38.22)的出膏率之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;不同加水量與出膏率之間

4、不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)聯(lián)系(F=0.10)。
　　進(jìn)一步采用SNK法進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果表明:提取2次與提取3次的出膏率不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，兩者均與提取1次的出膏率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;提取1.5小時(shí)和提取2小時(shí)的出膏率不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，兩者均與提取1小時(shí)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;不同加水量的出膏率之間不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　由此確定煎煮工藝為A(2，1)B(3，2)C(2)，即:①提取次數(shù)為2次;②提取時(shí)間為第一次提取2小時(shí)，第二次提取1.5小時(shí);③由

5、于加水量對(duì)出膏率影響較小，確定為第一次加水10倍，第二次加水8倍。
　　3鹽酸小檗堿含量測(cè)定
　　經(jīng)過高效液相法測(cè)得各個(gè)樣品的含量與干膏的量成正比，即出膏量越多含有的鹽酸小檗堿的量也越多。因此以干膏得率作為衡量提取效率的指標(biāo)是可行的。
　　結(jié)論:通過試驗(yàn)確定了行瘀降糖膠囊的最優(yōu)的制備工藝:將1/3處方量的黃連、全部量的大黃、1/2處方量的麩炒山藥，烘干，粉碎過60目篩，備用;取2/3處方量的黃連、桑白皮、知母、茯苓、澤

6、瀉、枳實(shí)、1/2處方量的山藥、紅花、川牛膝，置多功能提取罐內(nèi)加水煎煮兩次，第一次加水10倍，煎煮2小時(shí)，第二次加水8倍，煎煮1.5小時(shí)，合并兩次的提取液，濾過，選用多效濃縮器進(jìn)行濃縮至相對(duì)密度1.25(90℃)左右，常壓濃縮;將黃連、大黃、山藥的細(xì)粉均勻拌入清膏中，烘干;烘干后的干膏粉碎成細(xì)粉，裝入空心膠囊，即得。該工藝穩(wěn)定、可行。
　　第二部分行瘀降糖膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究
　　目的:建立處方中黃連、大黃、枳實(shí)三味藥的薄層鑒別方

7、法，以及黃連中鹽酸小檗堿的含量測(cè)定方法，以完善行瘀降糖膠囊的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。
　　方法:以最優(yōu)的制備工藝制作出三批樣品用以下方法進(jìn)行鑒別，檢測(cè)。
　　1用薄層色譜法對(duì)處方中的黃連、大黃、枳實(shí)進(jìn)行鑒別;
　　2用高效液相法對(duì)鹽酸小檗堿進(jìn)行含量測(cè)定。
　　3并按照2010版藥典規(guī)定進(jìn)行制劑通則的檢測(cè)，即水分，裝量差異，崩解時(shí)限，微生物限度檢測(cè)。
　　結(jié)果:
　　1薄層色譜鑒別黃連、大黃、枳實(shí)，以正丁醇-冰醋

8、酸-水(7∶1∶2)為展開劑，在紫外燈(365nm)下檢識(shí)黃連斑點(diǎn)清晰;以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，氨熏后日光下檢識(shí)大，黃斑點(diǎn)清晰;以乙酸乙酯-甲醇-水(100∶17∶13)為展開劑，晾干后噴以三氯化鋁試液，放置2小時(shí)后，置紫外燈(365nm)下檢視枳實(shí)斑點(diǎn)清晰。
　　2高效液相法采用依利特Hypersil ODS2 C18(250mm×4.6mm，5um)，流動(dòng)相:乙腈∶0.05m

9、ol/L磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)pH=3）=30∶70，柱溫:25℃，流速:1ml/min，波長345nm的色譜條件，測(cè)得鹽酸小檗堿回歸方程為:Y=71249X+84810，r=0.9995在2.5-50μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。測(cè)出樣品的平均含量為1.371％，該方法穩(wěn)定可行，精密度高，重現(xiàn)性好。
　　3水分，裝量差異，崩解時(shí)限，微生物限度均符合中國藥典2010版制劑通則的規(guī)定。
　　結(jié)論:
　　1對(duì)行瘀降糖膠囊中黃連、大黃