TLR7激活對BxPC-3細胞相關(guān)細胞因子表達的影響及甲羥戊酸代謝途徑對BxPC-3細胞增殖的影響.pdf

1、目的：
　　探討TLR7配體Gardiquimod對BxPC-3細胞相關(guān)細胞因子表達的影響及其可能的信號機制。
　　方法：
　?。?）培養(yǎng)人原位胰腺癌BxPC-3細胞，細胞經(jīng)過不同時間點（0 h,0.2 h,0.5 h,1.0 h,3.0 h,6.0 h,12.0 h,24.0 h）TLR7的配體Gardiquimod(3μg/ml)的處理后，實時熒光定量PCR（Real-Time PCR）技術(shù)分析細胞因子IFN-λ1

2、、P53、PTEN、VEGF、MMP-9和TIMP-1在mRNA轉(zhuǎn)錄水平的變化；
　?。?）Western Blot技術(shù)檢測分析可能激活的絲裂原蛋白激活激酶-胞外信號調(diào)節(jié)激酶（MAPKs-ERK1/2）信號通路；
　　（3）加入MAPKs-ERK1/2特異性阻斷劑PD98059阻斷信號通路，探討MAPKs-ERK1/2信號通路對TLR7激活后相關(guān)的細胞因子表達的影響。
　　結(jié)果：
　　（1）實時熒光定量的結(jié)果顯示

3、，TLR7的激活能夠不同程度的上調(diào)細胞因子的表達，其中IFN-λ1和MMP-9上調(diào)大約3倍，TIMP-1、P53和PTEN上調(diào)大約2倍；VEGF的表達呈現(xiàn)隨時間波動變化的現(xiàn)象；
　　（2）TLR7的激活劑Gardiquimod能夠激活MAPKs-ERK1/2信號通路；
　?。?）特異性阻斷劑PD98059能夠有效阻斷ERK1/2的磷酸化作用；
　?。?）其上述的相關(guān)細胞因子的降低與其阻斷劑的加入有關(guān)。
　　結(jié)論：