腦室內(nèi)低溫對家兔急性大腦中動脈缺血模型HSP70表達的影響.pdf

1、目的：本試驗對家兔急性大腦中動脈缺血模型進行腦室內(nèi)低溫保護，通過檢測低溫組和常溫組家兔大腦中動脈缺血腦組織凋亡細胞和對熱休克蛋白70(Heat shockprotein 70 HSP70)表達的觀察，來探討腦室內(nèi)低溫對家兔大腦中動脈缺血模型細胞凋亡影響。 方法: 選用4-6個月齡雄性家兔16只，體重在2.8-3.2Kg，隨機分為2組：對照組(常溫生理鹽水)、低溫組(22℃低溫生理鹽水)各8只。應(yīng)用線栓法建立大腦中動脈閉塞

2、(MCAO)模型，進行腦室內(nèi)穿刺低溫液體灌注亞低溫干預(yù)，根據(jù)sawyer兔腦定位圖譜，于左側(cè)取失狀縫左6mm，冠狀縫前1mm處，牙科鉆鉆開露骨，用雙腔靜脈微導(dǎo)管穿刺腦室，雙腔腦室穿刺導(dǎo)管(內(nèi)徑1mm)穿刺兔側(cè)腦室三角區(qū)(由額角向枕角方向穿刺2cm)，固定導(dǎo)管后，導(dǎo)管進口接輸液固定導(dǎo)管，以等滲鹽水灌注。導(dǎo)管一端為液體入口，另一端為腦室內(nèi)液體流出口。在室溫24℃下，等溫組輸入等溫(37℃)等滲鹽水，低溫組輸入冷卻的22℃等滲鹽水，緩慢滴注(

3、3-4ml/min滴速持續(xù)滴入)，雙腔管出口接虹吸管，以相同速度持續(xù)引流，持續(xù)3小時。停止腦室滴注，灌注結(jié)束后縫合切口皮膚。自然復(fù)溫，低溫全過程維持腦質(zhì)溫度在35±0.5℃，右側(cè)同位置牙科鉆鉆顱骨露出硬腦膜，使用紅外線溫度計測溫。術(shù)后動物行為觀察：動物麻醉蘇醒后，觀察其肢體運動情況。此后置于室溫飼養(yǎng)，24h后觀察兔行為及肢體癱瘓情況，參照ZeaLongal及Bederson檢查法，進行5分制評分，評分標準為：0分：無神經(jīng)損傷體征；1分：

4、病灶對側(cè)前爪不能完全伸展；2分：除I級征象外并有癱瘓側(cè)阻力下降；3分：除I級Ⅱ級征象外，活動時有向癱瘓側(cè)傾倒；4分：不能自發(fā)行走，意識喪失。24小時后采用SABC方法檢測各組腦組織HSP70表達，TUNEL方法檢測凋亡細胞。 結(jié)果: 1、術(shù)后24 h時兔神經(jīng)病學(xué)體征評分以及動物行為觀察：常溫組為(3.1±0.5)分，低溫組為(1.5±0.5)分，經(jīng)t檢驗兩組有顯著差異(P<0.05)。常溫組中有6只動物出現(xiàn)右側(cè)肢體完全癱

5、瘓，另外2只可以爬行。低溫組中有6只可以爬行，另外2只可以跳躍。 2、腦組織細胞調(diào)亡和HSP70表達的檢測結(jié)果：TUNEL染色陽性細胞核中呈現(xiàn)有棕黃色顆粒，HSP70染色細胞漿著色呈棕黃色。低溫組的TINEL染色陽性細胞數(shù)和HSP70染色陽性細胞數(shù)明顯低于和高于常溫組，差異有顯著意義(P<0.05)。 結(jié)論: 經(jīng)腦室內(nèi)低溫保護的動物偏癱程度輕，缺血區(qū)腦組織內(nèi)出現(xiàn)}{SP70陽性細胞數(shù)較常溫組要多，凋亡細胞較常溫組