荷葉黃酮提取、分離及其對(duì)葡萄糖激酶作用的研究.pdf

1、荷葉為睡蓮屬植物蓮(Nelumbo nucifera Gaertn)的葉片，在全世界分布廣泛，是藥食兩用植物。近年來(lái)研究表明，荷葉具有降脂減肥、抗自由基、抗氧化、抗衰老、抑菌與抗病毒等多種生理功能，其中黃酮為其主要活性物質(zhì)之一，而且黃酮類(lèi)化合物還具有降血糖作用。本文旨在通過(guò)對(duì)荷葉黃酮的提取、分離純化，繼而對(duì)其進(jìn)行深度研究，對(duì)分離得到的荷葉黃酮進(jìn)行葡萄糖激酶激活研究，為有效利用荷葉資源提供理論基礎(chǔ)。為此本論文開(kāi)展了以下工作： 1通

2、過(guò)單因素、Plackett-Burman設(shè)計(jì)和響應(yīng)面分析法，研究了超聲波輔助提取荷葉黃酮的最佳工藝條件。以荷葉總黃酮提取率為指標(biāo)，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)確定了荷葉黃酮提取工藝的參數(shù)范圍，通過(guò)Plackett-Burman設(shè)計(jì)和響應(yīng)面分析法確定了最佳提取條件。結(jié)果表明，最佳提取條件為乙醇濃度67％，液固比34:1，超聲提取40 nun，提取3次，該條件下荷葉總黃酮提取率為3.17％。 2采用大孔樹(shù)脂和聚酰胺對(duì)荷葉黃酮進(jìn)行純化。通過(guò)靜態(tài)吸附

3、-解吸實(shí)驗(yàn)，從HPD-100、HPD-100 A、HPD-400 A和聚酰胺中篩選出聚酰胺對(duì)荷葉黃酮進(jìn)行純化，通過(guò)研究徑高比、上樣液濃度、水洗量、洗脫劑濃度和用量，確定出最佳純化工藝。結(jié)果表明，聚酰胺對(duì)荷葉黃酮具有較好的吸附和解吸能力，最佳吸附條件：徑高比1:6，上樣液濃度10.668 mg·mL-1:最佳解吸條件：5倍柱體積的70％乙醇作為洗脫劑。 3采用聚酰胺柱層析法分離荷葉黃酮，得到A、B、C和D四個(gè)組分，經(jīng)薄層色譜法檢測(cè)

4、，組分D中主要含有槲皮素，結(jié)合高效液相色譜法測(cè)定槲皮素的含量，此方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為7.9％，平均回收率為88.6％，測(cè)得每克于荷葉粉中槲皮素的含量為0.17 mg。 4采用自制固相萃取小柱結(jié)合HPLC法測(cè)定荷葉中槲皮素的含量，確定了固相萃取柱的洗脫劑用量為14 BV，該方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為9.08％，平均回收率為99.49％。 5采用自制毛細(xì)管填充固相微萃取柱結(jié)合HPLC法測(cè)定荷葉中槲皮素的含量，確定了該固相微萃取柱的