銀屑病角質(zhì)形成細(xì)胞微衛(wèi)星雜合性缺失的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文銀屑病角質(zhì)形成細(xì)胞微衛(wèi)星雜合性缺失的實(shí)驗(yàn)研究姓名：雍磊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：皮膚性病學(xué)指導(dǎo)教師：王詩(shī)淇;李紅文20030506鄭州大學(xué)2 0 0 3 屆碩士畢業(yè)論文 銀屑病角質(zhì)形成細(xì)胞微衛(wèi)星雜合性缺失的實(shí)驗(yàn)研究本實(shí)驗(yàn)選取2 3 例進(jìn)行期銀屑病患者，其中男1 4 例，女9 例：年齡1 2 ．6 7 歲，平均年齡4 4 0 9 士90 1 歲；其中有家族史者1 3 例，無(wú)家族史者1 0 例；早發(fā)型和晚發(fā)型者分別為1 6

2、 例和7 例：尋常型銀屑病患者1 7 例，其它臨床類型者6 例。分別取同一患者的皮損和非皮損區(qū)表皮，進(jìn)行體外原代細(xì)胞培養(yǎng)獲得角質(zhì)形成細(xì)胞，經(jīng)蛋白酶k 消化后，采用酚、氯仿法提取角質(zhì)形成細(xì)胞的基因組D N A 。應(yīng)用多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)( p o l y m e r a s e c h a i nr e a c t i o n ，P C R ) 擴(kuò)增微衛(wèi)星D N A 片段， 擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳( p o l y a c r y l

3、 a m i d eg e le l e c t r o p h o r e s i s ，P A G E ) 后，用銀染技術(shù)進(jìn)行顯色。結(jié)果1 ．2 3 例銀屑病患者皮損區(qū)角質(zhì)形成細(xì)胞中在D 9 s 1 6 0 4 位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)1 0 例，在D 9 s 1 7 1位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)5 例存在L O H ；在非皮損區(qū)的D 9 s 1 6 0 4 位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)3 例，在D 9 s 1 7 1 位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)2 例存在L O H ，兩個(gè)位點(diǎn)間比較L O H 發(fā)生頻率

4、無(wú)顯著性差異( P > o ．0 5 ) ；但皮損區(qū)的角質(zhì)形成細(xì)胞在微衛(wèi)星位點(diǎn)D 9 s 1 6 0 4 ，L O H 發(fā)生頻率明顯高于非皮損區(qū)( P0 ．0 5 ) 。4 ．尋常型銀屑病患者皮損區(qū)角質(zhì)形成細(xì)胞中D 9 s 1 6 0 4 和D 9 s 1 7 1 兩個(gè)位點(diǎn)L O H發(fā)生頻率分別為4 7 ．1 ％( 8 ／1 7 ) 和2 3 ．5 ％( 4 ／1 7 ) ，其它臨床類型者分別為3 3 ．3 ％( 2 ／6 ) 齊