ADAMTS-1在促性腺激素預(yù)處理小鼠圍排卵期卵巢中的表達(dá)和調(diào)控.pdf

1、排卵是女性生殖過程中的一個(gè)必不可少的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，是由促黃體生成素LH激發(fā)可受精的成熟卵泡從卵泡壁釋放的一種復(fù)雜的多基因、多步驟參與的過程。在卵母細(xì)胞被釋放的過程中，其周圍的細(xì)胞外基質(zhì)的水解和重組以及卵泡壁特定部位的局限性破裂成為卵母細(xì)胞得以順利排出的關(guān)鍵性環(huán)節(jié)。基于具備上述類似炎癥樣反應(yīng)的過程，排卵這種由LH激發(fā)的酶級(jí)聯(lián)樣反應(yīng)涉及到很多炎癥相關(guān)基因，尤其是在卵母細(xì)胞被釋出出這一重要環(huán)節(jié)中編碼蛋白水解酶的基因起著關(guān)鍵性作用，它們通過參與其中

2、的細(xì)胞外基質(zhì)的分解與合成這些重要的重組事件來調(diào)節(jié)排卵。ADAMs是近來發(fā)現(xiàn)的一類編碼解整聯(lián)蛋白金屬蛋白酶的基因家族，ADAMTS-1是新發(fā)現(xiàn)的此家族中的一個(gè)成員，含有三個(gè)重復(fù)的血小板凝血酶敏感蛋白基序，被證實(shí)在炎癥反應(yīng)中起重要作用。
　　 目的：探討新發(fā)現(xiàn)的一種與炎癥相關(guān)的金屬蛋白酶ADAMTS-1(含血小板凝血酶敏感蛋白基序的解整聯(lián)蛋白金屬蛋白酶-1)在圍排卵期小鼠卵巢中的表達(dá)及其基因的主要調(diào)節(jié)方式。
　　 方法：取動(dòng)

3、情前期的C57/BL6雌性小鼠分兩組，實(shí)驗(yàn)組通過每只分別腹腔注射促性腺激素孕馬血清(PMSG)4IU和人絨毛膜促性腺激素(hCG)5IU(在注射PMSG48h后使用)誘發(fā)小鼠超排卵；拮抗組于促性腺激素(PMSG 4IU/HCG 5IU/只)處理過程中加用RU486(孕激素受體PR拮抗劑)1 mg/只灌胃，兩組同時(shí)設(shè)立對(duì)照組。所有小鼠分別于HCG注射后2 h、4 h、6 h、8 h、12 h、16 h、24 h、48 h、72 h頸椎脫臼

4、處死，對(duì)照組于HCG注射時(shí)間處死。對(duì)所有小鼠雙側(cè)卵巢分別采用免疫組化對(duì)ADAMTS-1進(jìn)行定位分析和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法進(jìn)行圍排卵期ADAMTS-1 mRNA動(dòng)態(tài)表達(dá)水平的半定量分析。
　　 結(jié)果：免疫組化試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組ADAMTS-1主要表達(dá)于卵巢表面大卵泡的顆粒細(xì)胞層；拮抗組則未見明顯表達(dá)并可見HCG 16 h后發(fā)育正常的卵母細(xì)胞仍然滯留于卵泡中。RT-PCR檢測(cè)方法發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組ADAMTS-1 mRNA水平