牛奶中青霉素殘留的微生物學檢測技術(shù)研究及應(yīng)用.pdf

1、青霉素是獸醫(yī)臨床上廣泛使用的一類抗生素，一般采用乳房內(nèi)注射的用藥途徑來治療和預(yù)防奶牛的乳腺炎，而由此引起的牛奶中青霉素殘留是一個全球性的問題。由于牛奶中青霉素殘留對消費者健康的危害及青霉素耐藥性菌株的產(chǎn)生，對牛奶中青霉素殘留的檢測和控制是目前世界各國政府所關(guān)注的問題。而目前我國對牛奶中青霉素殘留檢測的方法的靈敏度達不到我國對牛奶中青霉素殘留的最高殘留限量的要求，有必要對牛奶中青霉素殘留的檢測方法進行研究，以達到世界先進水平。 本

2、論文主要研究了當前國外先進的牛奶中青霉素殘留的檢測方法，并建立牛奶中青霉素殘留的微生物檢測技術(shù)，且應(yīng)用于我國的殘留監(jiān)控計劃中去，推動我國牛奶中青霉素殘留檢測技術(shù)與國際接軌，保證國內(nèi)牛奶安全和消費者的身體健康。 目前國外常用的牛奶中青霉素殘留檢測的微生物學檢測方法有微生物抑制法、微生物受體法和酶比色法。微生物抑制法有嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片法、戴爾沃-p法、戴爾沃-p-多項測試法、CHARM抑制法、CHARM農(nóng)場測試法、嗜熱鏈球菌Va

3、lioT101法、亮黑還原法、藤黃微球菌法、三磷酸腺苷法、三碟法、六碟法等，而微生物受體法主要是CHARMⅡ法，酶比色法主要是Penzyme法。 本論文建立了嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片法和CHARMⅡ法，用于檢測牛奶中的青霉素殘留。CHARMⅡ法采用3H或14C標記的青霉素和牛奶中的青霉素殘留在細菌表面的特異性受體位點進行競爭，樣品經(jīng)離心除去上清液，沉淀在閃爍液重新懸浮，用液體閃爍計數(shù)器來測量其放射性，然后將樣品的放射性與判定點比較，

4、樣品的放射強度與樣品中殘留物的含量成反比。此法的檢測限為2ppb，檢測時間為15分鐘。嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片采用嗜熱脂肪芽胞桿菌作為測試菌株，培養(yǎng)溫度為55±2℃，并對牛奶樣品進行82±2℃加熱處理，以去除牛奶中存在的干擾物質(zhì)，方法的檢測限為4ppb，檢測時間為3-4小時，并采用青霉素酶法對青霉素殘留進行初步確認。 這二個方法檢測限和精密度均能達到我國對牛奶中青霉素殘留監(jiān)控的最高殘留限量的要求，并應(yīng)用于國家殘留監(jiān)控計劃中去，200