線粒體膜磷脂與紅蓮型水稻細胞質(zhì)雄性不育關(guān)系的研究.pdf

1、植物細胞質(zhì)雄性不育在高等植物界普遍存在，是作物雜種優(yōu)勢利用的基礎(chǔ)。大量研究表明，線粒體功能的某些改變是導致細胞質(zhì)雄性不育的原因。本文以紅蓮型水稻細胞質(zhì)雄性不育的不育系(YTA)，保持系(YTB)以及雜種F1代紅蓮2號(HL2)的黃化苗為材料，研究線粒體膜磷脂與細胞質(zhì)雄性不育的關(guān)系。主要結(jié)果如下： 1：線粒體膜磷脂的高效液相色譜(HPLC)分離采用不同的色譜柱及不同的流動相體系探討了HPLC分離膜磷脂的最佳色譜條件。結(jié)果表明流動相

2、用乙腈-甲醇-85％磷酸(100:10:0.8，V/V)，正相色譜柱KR100-SIL(250×4.6mm，5μm)，檢測波長205nm，在等度條件下22分鐘內(nèi)能使水稻線粒體膜磷脂的六種主要組分得到較好分離。用外標法對其中五種成分進行了定量，線性范圍為0.005～2mg/mL，回收率為95.9％～100.6％，相對標準偏差為0.32％～1.24％，表明在選用的色譜條件下，測定線性范圍寬，色譜重復(fù)性較好，能用于生物膜磷脂的微量測定。

3、 2：紅蓮型水稻線粒體總膜、內(nèi)膜、外膜膜磷脂組分的比較用上述確定的最佳液相色譜條件分析了水稻線粒體總膜、內(nèi)膜以及外膜磷脂的各組分，并用面積歸一化法定量分析了各種膜磷脂的含量配比。結(jié)果表明育性不同的“三系”之間線粒體膜磷脂配比存在明顯的差異。具有相同細胞質(zhì)來源的不育系YTA和恢復(fù)基因?qū)胂礖L2，線粒體總膜磷脂及內(nèi)膜磷脂的PI和PC的相對百分含量基本相同，而與具有可育細胞質(zhì)的YTB的差異極顯著。不育系在導入恢復(fù)基因后得到的雜種HL2與原

4、不育系相比，線粒體膜磷脂PE相對百分含量明顯增高，PS、PA的相對百分含量則明顯下降；這表明線粒體的膜磷脂組分的含量配比除了受細胞質(zhì)基因影響外，還受到核基因的明顯影響。暗示不育系與恢復(fù)基因?qū)胂甸g線粒體的膜磷脂組分的含量配比的變化可能與HL-CMS水稻線粒體功能有關(guān)。 3：紅蓮型水稻線粒體總膜、內(nèi)膜、外膜膜磷脂脂肪酸組分的比較以毛細管氣相色譜柱，采用程序升溫法分離了膜磷脂脂肪酸各組分，并用面積歸一化法定量計算了膜磷脂脂肪酸的含量

5、配比。結(jié)果表明育性不同的“三系”之間線粒體膜磷脂脂肪酸配比存在明顯的差異。除YTA內(nèi)膜與YTB內(nèi)膜，YTB外膜與HL2外膜的不飽和指數(shù)相似外，其它膜脂脂肪酸不飽和度兩兩均存在差異。由于膜磷脂脂肪酸各組分的差異以及其不飽和指數(shù)的差異反映了線粒體膜脂脂肪酸代謝以及膜流動性的差異，這種差異性可能會影響線粒體相關(guān)功能的執(zhí)行。暗示不育系與恢復(fù)基因?qū)胂甸g線粒體的膜磷脂脂肪酸組分的含量配比以及脂肪酸不飽和指數(shù)的變化可能與HL-CMS水稻線粒體功能有