大豆（Glycine max）細胞質雄性不育系線粒體基因組的RAPD分析.pdf

1、植物雄性不育是植物界普遍存在的現(xiàn)象，它是利用雜種優(yōu)勢生產雜交種的基礎，可以省去人工去雄，達到降低成本的目的。到目前為止，大豆已選育十幾個不同且育性穩(wěn)定的質核互作雄性不育系，并已初步實現(xiàn)利用雜種優(yōu)勢獲得大豆產量上的突破，但對大豆細胞質雄性不育分子機理的研究還是較少。為此，本文以62對大豆細胞質雄性不育系及相應保持系為材料，采用RAPD分子標記技術對mtDNA基因組進行標記和多態(tài)性分析，并對獲得的部分不育系和保持系特異譜帶進行測序分析。

2、 主要研究結果如下： 1．設置5個蔗糖梯度(30％，35％，40％，45％，50％)再經兩次超速離心(35000rpm)分離線粒體可以保證分離到線粒體DNA的純度，從而確保線粒體DNA的提取質量。 2．OPA-03、OPD-20、OPE-01、OPG-17、OPH-18、OPK-07、OPM-06、OPP-15、OPQ-12、OPQ-13、OPR-03等11個引物在保持系中擴增出特異產物，OPD-02、OPL-13、

3、OPN-03等3個引物在不育系中擴增出特異產物，OPB-06、OPI-09、OPL-10等3個引物在保持系和不育系上均擴增出特異產物，但片段大小不同。這些特異的存在可能與大豆細胞質雄性不育的產生有關。 3．對上述擴增獲得的部分目的片段(8個)進行了測序，除OPN-03擴增的特異片段為未知序列外，其它7個擴增的特異序列均與植物線粒體基因組都具有較高的同源性。這也進一步說明我們提取的線粒體DNA純度較高。 4．引物OPA-0