中國男性外周血淋巴細胞年齡效應(yīng)的細胞遺傳學(xué)研究.pdf

1、衰老是一種遺傳因素和外界環(huán)境共同影響的，由在細胞水平上發(fā)生的變化逐步積累并最終表現(xiàn)在組織器官水平上的現(xiàn)象。在衰老的過程中，有許多因素會誘發(fā)細胞內(nèi)遺傳物質(zhì)的損傷(如基因突變、端?？s短、細胞內(nèi)調(diào)控機制失調(diào)等)。在這些與衰老有關(guān)的遺傳物質(zhì)的損傷中，最為明顯的表現(xiàn)就是在細胞分裂過程中染色體分離異常以及非整倍體細胞的年齡效應(yīng)。 在本次研究中，我們采用cytokinesis-blockmethod分別從染色體分離異常的角度以及非整倍體細胞命

2、運的角度探討中國男性外周血淋巴細胞中的年齡效應(yīng)： 1.運用cytokinesis-blockmethod，我們首次研究并報道了在中國男性的外周血淋巴細胞中染色體分離異常的年齡效應(yīng)。本文收集了14名老年(60-70歲之間)和10名青年(22-26歲之間)中國男性的外周血，從中分離得到淋巴細胞并進行培養(yǎng)，以松胞素B阻滯細胞質(zhì)分裂而獲得雙核細胞，利用人X、Y和2號染色體特異的著絲粒探針進行熒光原位雜交，以檢測X和Y染色體的分離異常。發(fā)

3、現(xiàn)：老年人淋巴細胞中，X染色體(老年組9.2±3.2‰，青年組1.1±0.9‰，P<0.001)和Y染色體(老年組2.5±1.9％，年輕組0.2±0.3‰，P<0.001)丟失的頻率較青年人顯著升高；X染色體(老年組16.5±3.4‰，年輕組3.5±1.1‰，P<0.001)和Y染色體(老年組7.2±2.6‰，年輕組2.4±1.3‰，P<0.001)不分離的頻率也隨著年齡增加而顯著升高；在老年人和青年人的淋巴細胞中，無論X染色體還是Y染

4、色體，其染色體不分離的頻率均顯著高于丟失的頻率；觀察到的多種染色體分離異常同時發(fā)生的頻率也顯著高于相應(yīng)的預(yù)期頻率。這些結(jié)果表明，年齡顯著影響中國男性淋巴細胞中X和Y染色體的正常分離；與染色體丟失相比，染色體不分離是中國男性性染色體分離異常的是主要類型；細胞內(nèi)負(fù)責(zé)染色體精確分離的機制出現(xiàn)異?？赡軙瑫r引起X和Y染色體的丟失及不分離。 2.我們分析了發(fā)生染色體分離異常的有絲分裂理論上應(yīng)產(chǎn)生的子細胞，在理論上應(yīng)產(chǎn)生的子細胞群體中Chr

5、X-細胞在淋巴細胞群體中所占比例值為25.7‰，而我們在體內(nèi)的外周血淋巴細胞群體中實際并未觀察到ChrX-細胞，從這一結(jié)果中，我們推測X染色體的缺失對男性淋巴細胞的存活有極大的影響。此外，通過比較進入分裂形成雙核的非整倍體淋巴細胞以及未進入分裂的單核非整倍體淋巴細胞，我們探討了不同染色體的缺失或者獲得對淋巴細胞分裂能力的影響。結(jié)果表明，在老年人的幾種非整倍體外周血淋巴細胞中，Y染色體缺失的淋巴細胞(ChrY-)的分裂能力最強(P<0.0

6、01，x2-test)，與之不同的是，在年輕人的非整倍體外周血淋巴細胞中，Y染色體缺失的淋巴細胞(ChrY-)的分裂能力與X染色體獲得的淋巴細胞(ChrX+)相似(P=0.46，X2-test)，而Y染色體獲得的淋巴細胞(ChrY+)的分裂能力最弱(P<0.001，x2-test)。這一結(jié)果說明了在老年人和青年人中Y染色體對細胞分裂能力的不同影響，說明了Y染色體隨年齡增長對細胞的功能和重要性的變化。綜上所述，不同染色體的缺失或者獲得對細