甘氨酸對燒傷大鼠器官功能保護(hù)作用的研究.pdf

1、大面積燒傷所產(chǎn)生的病理變化不僅發(fā)生在皮膚和皮下等直接受熱力損傷的組織和器官，還可引起全身各系統(tǒng)臟器的一系列變化。MODS已經(jīng)成為燒傷患者的主要死亡原因。目前，對于MODS還沒有公認(rèn)的特異性治療方法，還是以預(yù)防為主。近年來大量研究表明，燒傷后早期腸內(nèi)營養(yǎng)對胃腸道粘膜有明顯的保護(hù)作用，可防止應(yīng)激性潰瘍，胃腸道出血及腸道細(xì)菌毒素移位，能明顯降低傷后的高分解代謝，改善全身營養(yǎng)狀況。目前研究較多的是免疫營養(yǎng)制劑谷氨酰胺、精氨酸等。最近證實(shí)，甘氨酸

2、能夠?qū)箖?nèi)毒素血癥、失血性休克、中毒性休克和膿毒癥等損傷，改善內(nèi)毒素等因素引起的抗炎/致炎免疫失衡，對抗可能發(fā)生的MODS。 目的：探討嚴(yán)重?zé)齻笫髴?yīng)用甘氨酸拮抗內(nèi)毒素、保護(hù)臟器功能的作用。 方法： 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模及分組：Wistar大鼠96只(北京軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)，雌雄不拘，大鼠造成20％深I(lǐng)I度以上燒傷，傷后6h腹腔注射乳酸林格氏液(40ml/kg)延遲復(fù)蘇，復(fù)蘇后3h腹腔注射LPS溶液10mg

3、/kg，治療組在LPS攻擊的同時(shí)分別給予濃度為1g/3ml的Gln溶液、Gly溶液(日本味之素公司)灌胃。于相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)活殺動(dòng)物，留取血液以及各器官組織標(biāo)本。將動(dòng)物按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)隨機(jī)分為4組：單純燒傷組(A組)；燒傷+LPS攻擊組(B組)；燒傷+LPS攻擊+谷氨酰胺治療組(C組)；燒傷+LPS攻擊+甘氨酸治療組(D組)，每組再分為四個(gè)亞組，即傷后3h、6h、12h、24h，各時(shí)相點(diǎn)n=6。 2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血漿內(nèi)毒素水平測定：采用鱟試劑基

4、質(zhì)顯色定量測定各處理組大鼠血漿LPS含量。 3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝、腎功能測定：應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀對留取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血漿BUN、Cr、ALP、ALT水平測定。 4.組織病理形態(tài)學(xué)檢查：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物活殺后取肺、肝、腎組織，以15％福爾馬林固定，而后經(jīng)AF液固定4小時(shí)，80％乙醇4小時(shí)，95％乙醇10小時(shí)，無水乙醇I、無水乙醇II和丙酮各1小時(shí)逐級(jí)脫水；二甲苯I和二甲苯II各40分鐘透明；浸蠟包埋。最后，蠟塊經(jīng)Leitz1516切片機(jī)切5

5、um厚切片，常規(guī)HE染色，然后光鏡下觀察組織形態(tài)改變。 結(jié)果： 1.各組大鼠血漿LPS水平的變化：各組血漿LPS水平3h均升高，A組3h為峰值，B組6h達(dá)峰值，C、D組均在12h達(dá)峰值，其中B組6h顯著高于24h(P<0.05)。各組血漿LPS水平均在24h回落，B組LPS水平在各時(shí)相點(diǎn)均顯著高于A、C、D組(P<0.05)；C組、D組比較無顯著性差異(P>0.05)。 2.不同實(shí)驗(yàn)條件下實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝腎功能的變化：

6、大鼠單純燙傷后，肝、腎功能在24小時(shí)內(nèi)輕度異常，LPS攻擊后肝、腎功能顯著異常，LPS攻擊同時(shí)給予Gln或Gly灌胃后，肝、腎功能有所好轉(zhuǎn)。 3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在不同實(shí)驗(yàn)條件下臟器組織病理形態(tài)學(xué)改變：大鼠單純燙傷后肝、腎、肺各臟器在24小時(shí)后從總體上均呈現(xiàn)間質(zhì)淤血、炎癥反應(yīng)的病理形態(tài)學(xué)改變，表現(xiàn)為：肺間質(zhì)血管擴(kuò)張淤血，部分肺泡間隔增寬，少量中性粒細(xì)胞浸潤；肝淤血，部分肝細(xì)胞空泡變性，肝竇擴(kuò)張淤血，中央靜脈淤血；腎間質(zhì)血管擴(kuò)張、充血，小

7、灶性出血局部腎小管上皮細(xì)胞變性，個(gè)別腎小球萎縮。LPS攻擊后各器官淤血、炎癥反應(yīng)加重，甚至有些組織出現(xiàn)局灶性壞死。而同時(shí)給Gln或Gly灌胃治療后，各器官淤血、炎癥反應(yīng)程度明顯減輕。Gln、Gly治療效果無明顯差別。 結(jié)論： 1.成功復(fù)制了20％深I(lǐng)I度大鼠燒傷模型和燒傷后MODS大鼠模型，觀察B、C、D組各時(shí)相點(diǎn)血漿LPS水平及肝腎功能指標(biāo)水平均顯著高于A組。 2.GLn、Gly具有器官功能保護(hù)作用。能降低燒傷