阿伐他汀對體外培養(yǎng)的多發(fā)性硬化患者外周血中炎性細胞因子及T淋巴細胞增殖能力影響的實驗研究.pdf

1、目的：本實驗通過用阿伐他汀等藥物干預體外培養(yǎng)的多發(fā)性硬化(Mutiple sclerosis，MS)患者外周T血淋巴細胞的增殖與分化，探討了阿伐他汀(Atorvastatin)對多發(fā)性硬化患者外周血炎性細胞因子及T淋巴細胞增殖的影響及其可能的作用機制，為Atorvastatin治療MS提供實驗基礎和理論依據。 方法：無菌采取所選取的18例多發(fā)性硬化病人及20例健康對照者的外周靜脈血(PB)4ml，用淋巴細胞分離液分離出外周血單個

2、核細胞，然后用1640培養(yǎng)液洗滌后調整細胞濃度為2×10<'6>／ml。將上述含淋巴細胞的培養(yǎng)液分成七組：健康對照組(Con組，n=20)、MS不加藥組(MS組，n=18)．MS加阿伐他汀組(Ator組，n=18)、MS加強的松組(Pred組，n=18)、阿伐他汀加強的松組(Ator+Pred組，n=18)、阿伐他汀加甲羥戊酸組(Ator+Mev組，n=18)，只加甲羥戊酸組(Mev組，n=18)。將上述幾組培養(yǎng)液于37℃孵箱中培養(yǎng)，培

3、養(yǎng)48小時后取上清液，用MTT法測T淋巴細胞增殖能力(48小時)，用ELISA法檢測IFN-γ(48小時)的水平，培養(yǎng)96小時后用ELISA法測其上清液中IL-4的分泌情況。 結果： (1)MTT法顯示：與MS組相比，Con組T細胞增殖能力無顯著差異，Ator組T細胞增殖被顯著抑制(p<0.05)。Atot+Mev組T細胞增殖能力顯著高于Ator組(p<0.05)。 (2)ELISA法顯示：MS組與con組相比，

4、其IL-4水平明顯降低(p<0.01)，而IFN-γ水平則顯著升高(p<0.01)。Ator組與MS組相比，當Atorvastatin濃度在5umol／L-25umol／L之間變化時，隨著Atorvastatin濃度的增大，IL-4水平逐漸升高，有顯著差異(組間比較p<0.05)。而Ator組IFN-γ水平則明顯低于MS組(組間比較p<0.05)。Ator+Pred組降低(IFN-γ)和升高(IL-4)的幅度最大(p<0.05)。Ato

5、r+Mev組IL-4水平顯著低于Ator組，隨著MVA濃度的增大，由Ator所致的IL-4水平的升高被明顯抑制(組間比較p<0.01)，當MVA>0.3mmol/L時，由Ator所致的IL-4水平的升高被完全抑制(p<0.01)；相反，Ator+Mev組之IFN-γ水平明顯高于Ator組，當MVA濃度大于0.1mmol/L時，隨著MVA濃度的增大，由Ator所致IFN-γ水平的降低被顯著抑制(組間比較p<0.05)，當MVA>1mmol

6、/L時，由Ator所致的IFN-γ水平的降低被完全逆轉(p<0.05)。 結論：(1)MS患者疾病活動期其外周血中Th1類炎性細胞因子活性明顯增強。(2)Atorvastatin能夠抑制MS患者外周血中T淋巴細胞的增殖、降低Th1類因子濃度并促進Th0細胞向Th2細胞分化。(3)Atorvastatin和強的松在促進MS患者外周血Th0細胞向Th2細胞分化方面具有協(xié)同作用；(4)甲羥戊酸(MVA)—可以逆轉Atorvastati