神經(jīng)生長因子緩釋微球的研制及體外特性的初步實驗研究.pdf

1、目的：
　　 1.以牛血清白蛋白(BSA)為模型蛋白,乳酸/羥乙酸共聚物(PLGA)為載體,通過優(yōu)化空白微球的制備工藝,為制備神經(jīng)生長因子緩釋微球奠定基礎(chǔ)；
　　 2.探索通過改良的復乳溶劑揮發(fā)法制備神經(jīng)生長因子緩釋微球,并考察其一般性質(zhì)和體外釋藥特征,從而為以后靶向治療脊髓損傷的動物實驗和臨床研究打下了堅實的基礎(chǔ)。
　　 方法：
　　 1.采用復乳溶劑揮發(fā)法制備BSA-PLGA微球,通過激光粒度分析儀以

2、及掃描電鏡考察其表觀形態(tài)及粒徑,采用BCA(二喹林甲酸)微量蛋白測定法測定微球的蛋白含量并計算包封率和載藥量,恒溫搖床緩釋法進行體外釋放,測定微球24h釋放率,以包封率、載藥量、粒徑及24h釋放率等為觀察指標,通過正交設(shè)計法優(yōu)化顯著影響微球制備工藝條件的BSA用量、PEG用量、PLGA用量、PVA濃度、NaCl濃度、超聲功率以及復乳攪拌速度等7種因素。
　　 2.以乳酸/羥乙酸共聚物(PLGA)為載體材料,分別采用全循環(huán)一體機裝

3、置(TROMS)和傳統(tǒng)復乳法制備神經(jīng)生長因子緩釋微球。通過激光粒度分析儀以及掃描電鏡考察其表觀形態(tài)及粒徑,采用ELISA法測定微球中神經(jīng)生長因子含量并計算其包封率,以微球形態(tài)、粒徑、包封率等為評價指標,并通過ELISA法和PC12細胞活性測定法考察其體外釋藥性質(zhì)。
　　 結(jié)果：
　　 1.通過正交設(shè)計優(yōu)化后的BSA-PLGA微球制備工藝條件是BSA用量為5mg、PEG用量為0.2mL、PLGA用量為200mg、PVA濃度

4、為1％、NaCl濃度為10％、超聲功率為40W、復乳攪拌速度為1000r/min。在此條件下制備的微球具有光滑的表面且形態(tài)規(guī)整均勻,近似圓形,無粘連,大部分微球的粒徑集中在(20.03±4.38)μm,突釋最少,包封率較高。
　　 2.通過改良復乳法和傳統(tǒng)復乳法制備的微球粒徑分別為(22.61±3.94)μm和(21.32±4.82)μm,包封率分別為(92.08±4.39)％和(89.17±3.74)％。改良組的神經(jīng)生長因子微

5、球可以持續(xù)分泌有生物活性的神經(jīng)生長因子長達7周,累積釋放率為85.7％,而傳統(tǒng)組的微球只能釋放4周,累積釋放率為60.8％,且第4周時釋放的神經(jīng)生長因子活性明顯低于改良組,差異有顯著性意義(P<0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1.通過優(yōu)化后的制備工藝條件簡單、穩(wěn)定,在此條件下可以制得包封率較高、突釋較小、粒徑適宜的BSA-PLGA微球,且經(jīng)過重復性實驗驗證后,證明該批微球具有形態(tài)良好,粒徑分布均勻,可重復性好等優(yōu)點,從