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文檔簡介
1、本文采用W/O/W方法制備聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)載表皮生長因子(EGF)緩釋微球。采用模型藥物BSA研究內(nèi)水相乳化劑濃度、外水相乳化劑濃度、有機(jī)溶劑配比、外水相pH值、鹽離子濃度五個(gè)制備條件對藥物包封率和體外釋放行為的影響,得到最優(yōu)制備條件。通過透射電鏡觀察微球形貌,動(dòng)態(tài)光散射粒徑分析儀測定微球粒徑及粒徑分布;ELISA法檢測微球體外釋藥行為。結(jié)果顯示,微球呈規(guī)則圓形,平均粒徑193.5nm,多分散系數(shù)為0.176,生長因子
2、包封率達(dá)85.6%,體外釋放實(shí)驗(yàn)表明微球在PBS緩沖溶液中具有較好的緩釋效果,釋藥規(guī)律符合Higuchi釋放動(dòng)力學(xué)模型Q=46.80738+10.09451t1/2(R=0.94341),累積釋放時(shí)間達(dá)24小時(shí)。 采用MTT法進(jìn)行EGF活性和緩釋微球安全性的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明不同濃度的緩釋微球?qū)π∈蟪衫w維細(xì)胞都有促進(jìn)增殖的能力,緩釋微球促進(jìn)細(xì)胞增殖的能力與微球濃度相關(guān),10μg/L為其促進(jìn)細(xì)胞生長的最適濃度。對比10μg/L E
3、GF緩釋微球和等量EGF原液對細(xì)胞增殖作用的影響發(fā)現(xiàn),緩釋微球促進(jìn)細(xì)胞增殖效果優(yōu)于EGF原液,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。研究不同濃度空白微球?qū)?xì)胞增殖能力的影響發(fā)現(xiàn),從0.01μg/L到100μg/L,這個(gè)濃度梯度內(nèi),緩釋微球材料對細(xì)胞均沒有毒性作用。 采用糖尿病潰瘍模型大鼠研究微球?qū)μ悄虿兊男迯?fù)作用。通過計(jì)算潰瘍面積變化可以直觀看出微球組治療效果優(yōu)于生長因子原液組和空白對照組,并且具有顯著性差異,治療21天時(shí)微球組愈
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