早期外用重組人表皮生長因子對糖尿病合并燒傷創(chuàng)面愈合影響機制的實驗研究.pdf

1、目的 :針對表皮生長因子對創(chuàng)面修復的積極作用，EGFR可調節(jié)皮膚創(chuàng)面愈合的多個方面。 方法: 第一部分：選取Wistar大鼠120只，隨機分為A、B、C、D共4個組，前3組經腹腔注射鏈脲佐菌素誘導糖尿病模型，檢測血糖，確立為糖尿病模型后8周，4組同時制作深Ⅱ度燙傷模型，通過病理和免疫組化驗證胰島的破壞情況和胰島素分泌情況，進一步確證模型。各組燙傷后給與不同處理，測定傷后不同時向點的創(chuàng)面愈合率；并于燙傷傷后不同時相點分別取創(chuàng)面全厚

2、皮膚組織，免疫組化和免疫印記兩種方法檢測EGFR的表達及定位情況； mRNA原位雜交的方法檢測EGFR mRNA的表達變化情況。第二部分：免疫組化方法檢測各時相點創(chuàng)面組織中EGF、bFGF， mRNA原位雜交的方法檢測EGF mRNA和FGF mRNA的表達情況；免疫組化的方法檢測各時相點創(chuàng)面皮膚組織中CD34的表達情況，TLINEL法檢測創(chuàng)面細胞凋亡率及其分布特點，并進行EGFR與兩種生長因子的相關性分析。 第二部分：免疫組

3、化方法檢測創(chuàng)面組織中EGF、bFGF的表達變化，均顯示出A組各生長因子增長較快水平較高，而B、C組則水平較低且不同程度的滯后；mRNA原位雜交的方法檢測EGF mRNA，bFGF mRNA的變化情況，同樣顯示出其動態(tài)變化的改變，與其蛋白變化想?yún)f(xié)調；免疫組化方法檢測各組創(chuàng)面組織中CD34的表達情況，反映出創(chuàng)面微血管變化亦發(fā)生不同程度的增長速度和水平；TUNEL方法原位檢測細胞凋亡變化，隨著創(chuàng)面的縮小，A組細胞凋亡率降低較為明顯，而B、C組

4、細胞凋亡率雖然亦有降低，但降幅明顯較小。 結論: 1、外用rhEGF同時控制血糖可以明顯加速糖尿病合并燒傷創(chuàng)面的愈合： 2、在控制血糖的基礎上，外源性EGF的持續(xù)刺激可以明顯增強其受體mRNA及蛋白的表達； 3、EGFR的改變可以影響內源性生長因子及其mRNA的表達，從而發(fā)揮生長因子的協(xié)調作用而加速創(chuàng)面的愈合； 4、在控制血糖的情況下，外源性EGF的持續(xù)刺激可以明顯加速創(chuàng)面微血管的形成，加速創(chuàng)面肉