HMGA2在膀胱癌中的表達(dá)及與上皮─間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)性研究.pdf

1、高遷移率族蛋白A（High mobility groupA ，HMGA）是與染色體結(jié)合的非組蛋白，含3個(gè)AT-溝DNA結(jié)合域及1個(gè)酸性末端，能與DNA 結(jié)合使其彎曲、拉伸、成環(huán)或解鏈而更有利于與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，或與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性，故又稱構(gòu)架轉(zhuǎn)錄因子。在調(diào)節(jié)基因表達(dá)，病毒的整合，胚胎分化，細(xì)胞周期，腫瘤轉(zhuǎn)化等生物過(guò)程中有重要作用。HMGA家族由HMGAla、HMGA1b、HMGA1c和HMGA2四種蛋白質(zhì)組成，前3種蛋白質(zhì)由同

2、一個(gè)基因編碼，該基因定位在染色體6p21，只是轉(zhuǎn)錄后的可變剪接使這3種蛋白質(zhì)長(zhǎng)度有所不同，HMGA2由一個(gè)斷裂基因編碼，該基因定位在染色體12q14-15。在正常細(xì)胞中，HMGA只限于在胚胎發(fā)生階段表達(dá)，隨著器官發(fā)生的逐步進(jìn)行，HMGA的含量也將隨之減少，在分化成熟細(xì)胞HMGA水平非常低或檢測(cè)不到。最近研究顯示HMGA2與腫瘤發(fā)生進(jìn)展密切相關(guān)。
　　 HMGA2基因重組是人類良性間充質(zhì)腫瘤的重要特征，并發(fā)現(xiàn)HMGA蛋白過(guò)度表達(dá)也

3、見(jiàn)于人類許多上皮來(lái)源的惡性腫瘤如乳腺癌，胰腺癌，肺癌，口腔鱗癌，且與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)，可作為預(yù)后的指標(biāo)。上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-MesenchymalTransition，EMT）是指上皮細(xì)胞在形態(tài)學(xué)上發(fā)生成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)變并獲得遷移、增值的能力，它是一種基本的生理病理現(xiàn)象，在胚胎發(fā)育、組織發(fā)生中起重要作用。此外，EMT也存在于多種病理過(guò)程中，如傷口愈合過(guò)程、腎臟纖維化、腫瘤進(jìn)展及轉(zhuǎn)移。最近研究顯示HMGA2介導(dǎo)EMT 與腫瘤

4、進(jìn)展、浸潤(rùn)相關(guān)。目前關(guān)于HMGA2在膀胱癌中的表達(dá)的研究還沒(méi)有報(bào)道。本研究探討HMGA2在膀胱癌患者中的表達(dá)及其臨床意義及與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)性。
　　 第一部分 HMGA2在膀胱癌中的表達(dá)及臨床意義
　　 目的：研究HMGA2在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)，并分析其與臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。
　　 方法：采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western-blot法檢測(cè)44例膀胱尿路上皮癌組織和18例相應(yīng)正常組織中HMGA2

5、 mRNA和蛋白的表達(dá)，免疫組化檢測(cè)148例膀胱尿路上皮癌石蠟切片和相應(yīng)30例正常組織中HMGA2蛋白的表達(dá)，并結(jié)合臨床資料進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果：實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western-blot結(jié)果顯示膀胱癌組織中HMGA2 mRNA和蛋白的表達(dá)明顯高于正常組織（P<0.001）。HMGA2的表達(dá)還與膀胱癌的病理分級(jí)(P<0.001)和臨床分期有關(guān)（P=0.002）。Western-blot顯示在正常組織中未見(jiàn)HMGA2蛋白表達(dá)，

6、而在腫瘤中都有表達(dá)。免疫組化結(jié)果顯示HMGA2 在52％（77/148）膀胱癌中表達(dá)，而30 例正常組織中均不表達(dá)，兩者比較有顯著性差異（P<0.001）。
　　 HMGA2的高表達(dá)與病理分級(jí)（P<0.001）和臨床分期（P=0.003）有關(guān)。HMGA2的高表達(dá)與非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌患者術(shù)后無(wú)復(fù)發(fā)生存及無(wú)進(jìn)展生存有關(guān)（分別為P<0.001，P=0.0004）。采用COX模型多因素回歸分析，發(fā)現(xiàn)HMGA2 是影響患者術(shù)后復(fù)發(fā)（P<0

7、.001）和進(jìn)展（P=0.006）的獨(dú)立預(yù)后因素。
　　 結(jié)論：與正常組織相比，HMGA2在膀胱癌組織中的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平都有過(guò)表達(dá)。
　　 HMGA2的表達(dá)還與腫瘤的分級(jí)和肌層浸潤(rùn)呈正相關(guān)。HMGA2過(guò)表達(dá)是預(yù)測(cè)患者術(shù)后復(fù)發(fā)和進(jìn)展的潛在標(biāo)記物。
　　 第二部分 HMGA2和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化標(biāo)記物在膀胱癌中的表達(dá)及其相關(guān)性分析
　　 目的：研究HMGA2、上皮-間質(zhì)標(biāo)記物（E-cadherin、N-cadhe

8、rin）在膀胱癌中表達(dá)，并分析其相關(guān)性，從而研究HMGA2在膀胱癌進(jìn)展及侵襲中的作用。
　　 方法：免疫組化檢測(cè)44例肌層浸潤(rùn)性膀胱癌石蠟切片和相應(yīng)15 正常組織中HMGA2、E-cadherin和N-cadherin蛋白的表達(dá)，并結(jié)合臨床資料進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果：肌層浸潤(rùn)性膀胱癌中HMGA2、E-cadherin和N-cadherin表達(dá)的陽(yáng)性率分別為72.7％、25％、59.1％，而在正常組織中分別為0％、86.7