桔梗飲片炮制工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、目的：本課題為河南省重大科技攻關(guān)課題“中藥飲片加工與炮制規(guī)范化研究(編號(hào)：0522030200)”的子課題，是“桔梗飲片加工炮制規(guī)范化研究”的一部分。桔梗藥材來源為桔?？浦参锝酃latycodon grandiflorum (Jacq.)A.DC．的干燥根。主要是通過對桔梗的臨床常用飲片規(guī)格、桔梗的炮制工藝和飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行規(guī)范化研究，規(guī)范桔梗飲片炮制工藝，建立飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，控制飲片質(zhì)量，保證中醫(yī)臨床用藥安全有效。 方法：在查

2、閱古文獻(xiàn)和現(xiàn)代文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，總結(jié)前人炮制經(jīng)驗(yàn)，撰寫文獻(xiàn)綜述。 以桔?？傇碥蘸徒酃Ｔ碥誅為指標(biāo)，采用藥典法測定桔梗總皂苷，RP—HPLC法測定桔梗皂苷D，對桔梗幾種不同炮制品：原藥材、生品、炒黃品、蜜炙品進(jìn)行比較研究。 以切片厚度、悶潤時(shí)間、烘干溫度為因素，選取不同水平，以桔?？傇碥蘸繛榭疾熘笜?biāo)，通過正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選桔梗切制最佳工藝。再以蜂蜜(中蜜)用量，蜂蜜稀釋用水量、烘干溫度、烘制時(shí)間等主要影響因素，以桔?？傇碥蘸徒酃Ｔ?/p>

3、苷D為檢測指標(biāo)，通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，采用綜合加權(quán)法對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，優(yōu)選出蜜炙桔梗最佳工藝。 在上述研究的基礎(chǔ)上，采集十批樣品，進(jìn)行中試生產(chǎn)，驗(yàn)證工藝的穩(wěn)定性和可行性。對十批中試樣品的桔梗飲片、蜜炙桔梗飲片，進(jìn)行理化鑒別、顯微鑒別實(shí)驗(yàn)：對水分、灰分、酸不溶灰分、水溶性浸出物含量、醇溶性浸出物含量進(jìn)行了測定，并規(guī)定了其限度標(biāo)準(zhǔn)；藥典法測定了桔梗、蜜炙桔梗飲片的桔?？傇碥蘸浚⑦M(jìn)行炮制前后的比較。在上述研究的基礎(chǔ)上，按照有關(guān)要求，分別

4、制定了含量限度，初步建立了桔梗、蜜炙桔梗飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(草案)。 采用SHIMADZU LC-2010AT高效液相色譜儀，Agilent HP-C18(4.6mm×250mm)高效液相色譜柱，檢測波長：210nm，流動(dòng)相：甲醇：0.1％磷酸水0.00～10 min(10：90)，10.01～20 min(15：85)，20.01～30 min(15：85)，30.01～35 min(20：80)，35.01～45min(25：75

5、)，45.01～55 min(25：75)，55.01～60 min(29.1：70.2)，60.01～80 min(29.1：70.2)，80.01～85 min(35：65)，85.01～120min(40：60)為梯度洗脫，流速：1.0ml/min，柱溫：40℃。分別建立桔梗，蜜炙桔梗飲片高效液相指紋圖譜。通過指紋圖譜Chromafinger° 2005 beta 0.1處理軟件對桔梗、蜜炙桔梗飲片指紋圖譜進(jìn)行相似度分析。

6、 結(jié)果：撰寫出“桔梗飲片炮制歷史沿革及現(xiàn)代研究概況”一篇文獻(xiàn)綜述。對桔梗幾種不同炮制品：原藥材、生品、炒黃品、蜜炙品進(jìn)行了比較研究的結(jié)果表明不同炮制方法對桔梗總皂苷和桔梗皂苷D含量有一定影響，桔梗不同炮制品總皂苷含量比較結(jié)果由低到高為：生品<原藥材<炒黃品<蜜炙品；不同炮制品皂苷D含量高低如下：原藥材>蜜炙品>炒黃品>生品。 通過正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選桔梗切制最佳工藝為悶潤2h，切片厚度為1mm，60℃烘3.5h。通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，采用綜

7、合加權(quán)法對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，優(yōu)選出蜜炙桔梗最佳工藝為15％的煉蜜，用煉蜜1/3量的水稀釋后拌勻，80℃烘1小時(shí)。桔梗、蜜炙桔梗飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果，可以考慮桔梗飲片水分不得過10.0％，蜜炙桔梗飲片水分不得過9.0％。桔梗飲片灰分不得過5.0％，酸不溶性灰分不得過1.0％。蜜炙桔梗飲片灰分不得過5.0％，酸不溶性灰分不得過1.0％。桔梗飲片水溶性浸出物含量按冷浸法測定不得少于52.0％，醇溶性浸出物含量不得少于13.0％。蜜炙桔梗水溶性浸出物含

8、量按冷浸法測定不得少于53.0％，醇溶性浸出物含量不得少于21.0％。對十批中試樣品炮制前后化學(xué)成分的比較研究結(jié)果表明，炮制后桔?？傇碥站兴黾?，且不同批次樣品中桔?？傇碥蘸坎顒e較大。 通過指紋圖譜處理軟件Chromafinger 2005 beta 0.1軟件對桔梗、蜜炙桔梗指紋圖譜進(jìn)行相似度分析，得出桔梗飲片指紋圖譜平均相似度不低于0.7；蜜炙桔梗飲片相似度不低于0.75。比較桔梗飲片與蜜炙桔梗飲片指紋圖譜的區(qū)別，證明炮

9、制后指紋圖譜色譜峰面積增大。 結(jié)論：對桔梗幾種不同炮制品：原藥材、生品、炒黃品、蜜炙品進(jìn)行了比較研究，結(jié)果表明不同炮制方法對桔梗總皂苷含量有一定影響。首次用高效液相法測定桔梗皂苷D含量，隨著炮制方法不同含量隨之發(fā)生變化，蜜炙后含量升高。通過正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選出桔梗飲片切制工藝和蜜炙桔梗工藝簡便，比較穩(wěn)定。中試生產(chǎn)驗(yàn)證了優(yōu)選桔梗炮制工藝的可行性；建立了桔梗、蜜炙桔梗飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(草案)可以用來監(jiān)測桔梗、蜜炙桔梗飲片質(zhì)量。建立桔梗、蜜炙桔