全面性癲癎伴熱性驚厥附加癥同胞患者GABA受體已知突變通道多態(tài)性分析.pdf

1、癲癎（epilepsyEP）是神經(jīng)系統(tǒng)常見的一組疾病，主要是由一組不同的病因所導(dǎo)致的腦部神經(jīng)元同步和異常放電，引起以意識(shí)障礙和（或）骨骼肌陣攣和（或）強(qiáng)直性抽搐為主要特征。目前全世界約有癲癎患者超過4000萬，我國約900萬。對(duì)癲癎的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行探討，不僅有利于明確癲癎的具體發(fā)作原因及過程，及時(shí)給予干預(yù)治療，而且對(duì)于糾正全社會(huì)對(duì)癲癎的錯(cuò)誤觀念，社會(huì)的和諧和穩(wěn)定，也具有重要的意義。長期以來，許多的研究者對(duì)癲癎的發(fā)病機(jī)理及診斷治療的研究取得

2、了豐碩的成果。尤其近些年來，在神經(jīng)遞質(zhì)和離子通道方面的研究如火如荼，也面臨更多的機(jī)遇與挑戰(zhàn)。
　　全面性癲癎伴熱性驚厥附加癥（GeneralizedEpilepsyWithFebrileSeizuresPlusGEFS+）是特發(fā)性全身性癲癎（idiopathicgeneralizedepilepsyIGE）中常見的一組疾病，呈常染色體顯性遺傳，有顯著的遺傳特性,外顯率約為60％-89％，被認(rèn)為可能是兒童期最為常見的一種遺傳性癲癎綜

3、合征。目前發(fā)現(xiàn)的與GEFS+的發(fā)病有關(guān)研究成果最多，所發(fā)現(xiàn)的通道突變的種類也較多。其中γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutycAcidGABA)受體通道的突變的研究也有進(jìn)展。目前發(fā)現(xiàn)的與GABA有關(guān)的突變位點(diǎn)包括R43Q、K289M、Q351XA322D,多為家系研究中發(fā)現(xiàn)，且陽性率很低。從理論上講，同胞患病具有較高的遺傳可能性。而家系中僅有同胞患病是一種特殊的類型。但目前未見到在同胞患者中進(jìn)行GEFS+關(guān)于GABA受體通道突變的

4、報(bào)道。
　　本實(shí)驗(yàn)選取了3組共6例GEFS+同胞患者，同時(shí)為了便于對(duì)比，選擇了6例散發(fā)的GEFS+患者，抽取所有實(shí)驗(yàn)者的外周血，提取DNA,同時(shí)設(shè)計(jì)已知突變位點(diǎn)的相關(guān)外顯子引物，分別為GABRG2中的外顯子2，外顯子8，外顯子9，及GABRA1中的外顯子10.利用所提取的DNA進(jìn)行PCR反應(yīng)以擴(kuò)增相應(yīng)的外顯子序列。反應(yīng)完成后行瓊脂糖凝膠電泳以檢測(cè)所獲得的外顯子序列條帶位置是否與已知的外顯子序列應(yīng)處的位置一致。若一致，則認(rèn)為反應(yīng)成功

5、，將反應(yīng)產(chǎn)物送公司測(cè)序，結(jié)果反饋后利用軟件進(jìn)行與已知正常序列的比對(duì)，以查找是否存在突變及多態(tài)性位點(diǎn)。得出相應(yīng)的結(jié)論。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　?。?）所有PCR反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳后可見條帶所處位置與已知序列的大小一致，認(rèn)為反應(yīng)是成功的。
　?。?）將反應(yīng)產(chǎn)物送公司測(cè)序后反饋的序列結(jié)果與正常序列經(jīng)比對(duì)后均未發(fā)現(xiàn)突變及多態(tài)性位點(diǎn)的存在。
　　本實(shí)驗(yàn)結(jié)論如下：
　　(1)在GEFS+同胞患者及散發(fā)患者中均未發(fā)現(xiàn)已