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文檔簡介
1、目的: 本課題研究脾切除對(duì)肝纖維化大鼠肝臟CTGF的表達(dá)和血清CTGF水平的影響,從而探討脾切除在肝纖維化治療中的可能作用。
方法: 雄性清潔級(jí)SD大鼠80只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組8只和模型組72只。對(duì)模型組大鼠皮下注射CCL4,建立72例肝纖維化大鼠模型。模型組大鼠隨機(jī)分成三大組,分別于建模開始,建模第5周,及建模第10周切除大鼠脾臟,并設(shè)立同期假手術(shù)組作為對(duì)照組。第一、二組及其對(duì)照組于建模后第10周,第三組及其對(duì)照組于建
2、模后14周分別取大鼠肝臟和血液標(biāo)本。用HE染色檢測(cè)肝纖維化程度,免疫組化方法測(cè)定肝臟CTGF的表達(dá),應(yīng)用HPIAS-1000電腦彩色圖像系統(tǒng)對(duì)陽性目標(biāo)進(jìn)行定量分析,應(yīng)用雙抗體夾心ELISA方法測(cè)定血清CTGF水平。
結(jié)果:
(1) CTGF陽性物質(zhì)主要位于肝間質(zhì)細(xì)胞的胞漿內(nèi),呈棕黃色。 CTGF陽性染色部位主要分布在匯管區(qū)、纖維間隔、炎癥區(qū),少數(shù)在肝竇內(nèi)。
(2)正常組大鼠和不同纖維化時(shí)期大鼠肝
3、臟CTGF的吸光度值分別為:0.016±0.007,0.108±0.011,0.159±0.008;正常組大鼠和不同纖維化時(shí)期大鼠血清CTGF(ng/ml)含量分別為:3.211±0.225,11.91±0.595,22.008±2.308。統(tǒng)計(jì)結(jié)果均表明,隨著肝纖維化的進(jìn)展,大鼠肝臟及血清CTGF含量逐漸增加(P<0.01)。
(3)不同時(shí)期切脾組大鼠血清CTGF的水平分別為(ng/ml):7.064±0.326,12.
4、245±0.448,17.001±0.252;而同期假手術(shù)組其血清CTGF的水平分別為(ng/ml):20.925±1.023,22.356±1.285,23.129±1.221。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,各切脾組血清CTGF含量明顯低于其同期假手術(shù)組(p<0.05)。
(4)根據(jù)HE染色結(jié)果,建模開始時(shí)切脾再行肝纖維化誘導(dǎo),肝纖維化進(jìn)程緩慢;建模后第5周切脾,肝臟病理狀態(tài)比對(duì)照組明顯緩解;建模后第10周切脾,肝臟炎性改變和纖維化程度
5、有一定減輕。
(5)不同時(shí)期切脾大鼠肝臟CTGF的陽性細(xì)胞吸光度值(A值)分別為:0.049±0.011,0.072±0.013,0.098±0.018;而同期假手術(shù)組CTGF陽性細(xì)胞A值分別為:0.157±0.035,0.165±0.012,0.182±0.029。結(jié)果表明,各切脾組肝臟CTGF陽性細(xì)胞A值明顯低于其對(duì)照組(p<0.05)。
(6)模型組中各手術(shù)組大鼠肝臟及血清CTGF的含量采用單因素方差分
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