丹芍化纖膠囊對大鼠纖維化肝臟Calpain表達的影響.pdf

1、目的:觀察在大鼠肝纖維化形成過程中超氧化物歧化酶(SOD)活性、鈣蛋白酶(Calpain)和核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κ B)表達的變化，旨在探討肝纖維化發(fā)生機制中Calpain的作用。應(yīng)用中藥復(fù)方丹芍化纖膠囊預(yù)防大鼠肝纖維化，觀察其對Calpain表達的影響，探討其預(yù)防肝纖維化可能的機制與Calpain的關(guān)系。
　　方法:雄性SD大鼠24只，隨機分為正常組、肝纖維化組（肝纖組）、丹芍化纖膠囊預(yù)防組（丹芍組）。肝纖組和丹芍組大鼠采用CCl

2、4和高脂低蛋白飲食復(fù)合病因刺激制備肝纖維化大鼠模型，造模時間為8周。從造模開始起，丹芍組大鼠同步給以0.1g/kg/d劑量丹芍化纖膠囊灌胃，共8周。實驗結(jié)束時殺鼠取血，測定血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、透明質(zhì)酸(HA)及肝組織超氧化物歧化酶(SOD)活性。取肝臟，稱重，固定，切片，行HE和Masson染色，光鏡下觀察肝組織的病理變化，并用免疫組化分別檢測肝組織中Calpain、NF-κB和α-SMA的表達。
　　

3、結(jié)果:(1)與正常組比較，肝纖組大鼠血清中內(nèi)AST、ALT、HA明顯增高(p＜0.01)，而肝組織內(nèi)SOD活性明顯降低(p＜0.01);(2)病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)肝纖組大鼠肝臟匯管區(qū)纖維組織增多，肝組織內(nèi)纖維結(jié)締組織明顯增生，形成條索深入肝小葉內(nèi)，纖維間隔粗大，部分肝小葉結(jié)構(gòu)完全破壞消失，假小葉形成，正常組大鼠肝臟組織無異常;(3)免疫組化結(jié)果顯示肝纖組與正常組比較，肝組織內(nèi)Calpain、 NF-κB和α-SMA的表達較正常組顯著增加(

4、p＜0.01或p＜0.05)。(4)經(jīng)丹芍化纖膠囊干預(yù)8周后，丹芍組大鼠與肝纖組大鼠比較，丹芍組大鼠肝臟AST、ALT和HA明顯降低(p＜0.01)，但與正常組比較，丹芍組大鼠肝臟內(nèi)ALT，HA增高依然明顯(p＜0.01);丹芍組大鼠肝組織內(nèi)SOD活性較肝纖組大鼠明顯升高(p＜0.01)，與正常比較，丹芍組大鼠肝臟內(nèi)SOD明顯降低(p＜0.01);HE和Masson染色發(fā)現(xiàn)，丹芍組大鼠肝細胞脂肪變性明顯，可見液化壞死為主，炎性細胞浸潤，

5、肝細胞再生較明顯，結(jié)締組織增生程度較肝纖組減輕，未見明顯假小葉形成;免疫組化結(jié)果顯示丹芍組大鼠肝臟中Calpain、α-SMA的表達較肝纖組顯著減少(p＜0.01或p＜0.05)，而NF-κB的表達量較肝纖組有減少，但無統(tǒng)計學(xué)意義;(5)pearson相關(guān)性分析顯示，正常組與肝纖組大鼠肝組織內(nèi)Calpain的表達與SOD的活性呈負相關(guān)性(p＜0.01);Calpain與NF-κB的表達呈正相關(guān)(p＜0.05)。
　　結(jié)論:1.Ca