化濁解毒方法對肝纖維化大鼠血清中TGF-β1及肝組織中CTGF的作用研究.pdf

1、目的:觀察化濁解毒方對肝纖維化大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)、結(jié)締組織生長因子（CTGF）水平的影響;探討化濁解毒方對實驗大鼠肝纖維化的防治作用及其機(jī)理，為化濁解毒方在臨床的廣泛應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 方法:建立DMN肝纖維化大鼠模型，清潔級SD大鼠70只，雄性，體重(200±20g)隨機(jī)分為正常對照組(n=10)，模型對照組(n=20)，鱉甲軟肝片組(n=10)，化濁解毒方低、中、高劑量組，每組10只。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后

2、，除正常對照組外均給予1％DMN10mg/kg體重腹腔內(nèi)注射，共13次，實驗第1周連續(xù)用藥3日，1次/日;第2-6周每周連續(xù)用藥2日，1次/日，每周固定開始給藥時間為周一上午9:00。至第4周末，大鼠中度肝纖維化模型建成。給藥:從第4周開始至8周末，正常組、模型對照組，給予生理鹽水10ml/kg灌胃，日1次，;化濁解毒方低、中、高劑量組分別給予含藥量為1.35g/ml、2.7g/ml、5.4g/ml的生藥水煎劑灌胃，灌胃液體量為10ml

3、/kg，1次/d。鱉甲軟肝片組，臨用時研末以蒸餾水配成混懸液，用藥量為0.154mg/kg，1次/d。于8周結(jié)束時，從腹主動脈取血，分離出血清。迅速解剖出肝臟，觀察肝臟的顏色、質(zhì)地，沿肝臟長軸切取約2mm厚的肝組織放入10％中性福爾馬林中固定，常規(guī)制備肝組織切片，切片厚度約4μm。部分肝組織用生理鹽水漂洗數(shù)次后，濾紙吸干，稱取0.5g，常規(guī)制備肝組織勻漿。然后3000r/min4℃離心，取上清液，-20℃冰箱保存?zhèn)溆?，用前恢?fù)至室溫。<

4、br>　　 采用免疫吸附法檢測大鼠血清中TGFβ1、肝組織勻漿中CTGF的水平。數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示，運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理。兩個樣本均數(shù)比較采用t檢驗，多個樣本均數(shù)比較行完全隨機(jī)設(shè)計單因素方差分析。
　　 結(jié)果:
　　 1、一般情況
　　 正常對照組大鼠進(jìn)食良好，皮毛順滑有光澤，精神狀態(tài)良好，喜動，體重逐步增長。模型對照組大鼠進(jìn)食不佳、精神不振、皮毛干枯黯淡、小便色黃，體重較前稍有增

5、加，但較正常組輕。各治療組大鼠進(jìn)食尚好、精神亦可、活動狀態(tài)尚可，體重逐漸增加，與正常組差別不顯著。
　　 2、化濁解毒方對肝纖維化大鼠肝臟病理形態(tài)學(xué)的影響
　　 正常組大鼠肝臟質(zhì)地軟，邊緣銳圓，表面光滑，新鮮，顏色略深紅，未發(fā)現(xiàn)斑點、突起。模型組大鼠肝臟腫大明顯，質(zhì)硬，呈暗紅色，表面粗糙，邊緣較鈍。各治療組大鼠肝臟腫大不甚明顯，質(zhì)地較脆，略呈暗紅色，表面較光滑，偶有細(xì)沙粒狀增生。光鏡下，正常組大鼠肝小葉排列規(guī)整，纖維組織

6、含量極少。模型組大鼠肝細(xì)胞變性、壞死，纖維組織大量增生，肝小葉結(jié)構(gòu)破壞。各治療組與模型組比較，肝臟損傷程度均較輕，但各治療組之間無明顯病理形態(tài)學(xué)差別。
　　 3、化濁解毒方對肝纖維化大鼠血清中TGF-β水平的影響
　　 模型組與正常組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);與模型組比較，各治療組除高劑量組外差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，其中化濁解毒方中劑量組有顯著差異(P＜0.01)。
　　 4、化濁解毒方

7、對肝纖維化大鼠肝組織中CTGF水平的影響
　　 模型組與正常組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);與模型組比較，各治療組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，化濁解毒方中劑量組差異顯著(P＜0.01);
　　 結(jié)論:
　　 1、化濁解毒方可以降低大鼠肝組織的炎癥、纖維化程度發(fā)展，改善其一般狀況，表現(xiàn)出良好的保肝護(hù)肝，防纖維化作用。
　　 2、化濁解毒方能顯著降低大鼠血清中的TGFβ1及肝組織CTGF水平的