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文檔簡介
1、目的:不同類型的骨關(guān)節(jié)損傷和疾病均可導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨缺損,因關(guān)節(jié)軟骨具有無直接的血管、淋巴管、神經(jīng)供應(yīng)以及代謝率低的生理特性,在一般的情況下自身難以修復(fù),因而一直以來,關(guān)節(jié)軟骨缺損修復(fù)都是國內(nèi)外醫(yī)學(xué)界普遍關(guān)注和迫切需要解決的問題。目前軟骨缺損修復(fù)的治療方法普遍仍處于研究階段,對于如何提高關(guān)節(jié)軟骨缺損修復(fù)的質(zhì)量已有許多報(bào)道。但目前各種促進(jìn)關(guān)節(jié)軟骨缺損修復(fù)的方法,均有其不足之處,尚需進(jìn)一步改進(jìn)。本實(shí)驗(yàn)通過軟骨下骨鉆孔方法建立兔膝關(guān)節(jié)軟骨全層缺損
2、模型,觀察兔膝關(guān)節(jié)軟骨全層缺損修復(fù)的過程,研究規(guī)則被動(dòng)運(yùn)動(dòng)(RPM)對關(guān)節(jié)軟骨全層缺損修復(fù)的影響。
方法:將30只新西蘭雄性兔60個(gè)膝關(guān)節(jié),用直徑3.2mm的骨科手術(shù)電鉆,于股骨髁面處鉆一直徑為3.2mm全層軟骨缺損,深度以缺損區(qū)滲血為準(zhǔn),造成直徑為3.2mm大小的關(guān)節(jié)軟骨全層缺損模型,并將其隨機(jī)分為三組:A組、B組和C組,每組各10只兔,20個(gè)兔膝關(guān)節(jié)。A組:于術(shù)后第1天開始,即進(jìn)行每天8小時(shí)的RPM(每兔每20分鐘進(jìn)行
3、一次為時(shí)2分鐘的持續(xù)被動(dòng)運(yùn)動(dòng),頻率控制在60次/分,上下午各4小時(shí)RPM)和籠內(nèi)自由活動(dòng);B組:于術(shù)后第1天開始,即進(jìn)行每天2小時(shí)的RPM(每兔每20分鐘進(jìn)行一次為時(shí)2分鐘的持續(xù)被動(dòng)運(yùn)動(dòng),頻率控制在60次/分,上下午各1小時(shí)RPM)和籠內(nèi)自由活動(dòng);C組:僅在籠內(nèi)自由活動(dòng)。分別于RPM干預(yù)4周和RPM干預(yù)12周時(shí)處死各組半數(shù)兔,再次稱重并進(jìn)行組間體重及增加體重比較,取各組關(guān)節(jié)軟骨缺損修復(fù)組織,并進(jìn)行大體形態(tài)觀察評分;蘇木素一伊紅染色(即H
4、E染色)的組織學(xué)形態(tài)觀察;番紅O染色研究蛋白多糖的表達(dá)以及免疫組織化學(xué)研究Ⅱ型膠原的表達(dá),并進(jìn)行評分。
結(jié)果:1在術(shù)前、RPM干預(yù)4周和RPM干預(yù)12周的各組兔平均體重及平均增加的體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。2 RPM干預(yù)4周、RPM干預(yù)12周各組關(guān)節(jié)軟骨臟染色結(jié)果觀察及與正常軟骨比較,A組為類軟骨組織修復(fù),修復(fù)組織表面較平整,內(nèi)含細(xì)胞形態(tài)與正常關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞相似,細(xì)胞層次較明顯,排列較規(guī)律,下潮線基本恢復(fù)。B組以類軟
5、骨組織修復(fù)為主,修復(fù)組織表面基本平整,內(nèi)含細(xì)胞較正常關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞少,形態(tài)近似,排列欠規(guī)律,細(xì)胞層次不明顯,下潮線部分恢復(fù)。C組可見大量纖維組織修復(fù),修復(fù)組織表面欠平整,缺損兩端與正常關(guān)節(jié)軟骨部分融合,內(nèi)含細(xì)胞形態(tài)與正常關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞差別較大,排列不規(guī)律,細(xì)胞層次不明顯,下潮線消失。RPM干預(yù)4周和RPM干預(yù)12周,A組大體形態(tài)學(xué)評分和組織學(xué)評分高于B組和C組,有顯著性差異(P<0.05),但是,B組與C組的大體形態(tài)學(xué)評分和組織學(xué)評分差異無
6、顯著性(P>0.05)。3RPM干預(yù)4、RPM干預(yù)12周時(shí)各組番紅O染色結(jié)果采用秩和檢驗(yàn)(等級資料的多個(gè)樣本比較Kruskal-Wallis H檢驗(yàn))進(jìn)行各組間比較,然后再進(jìn)行兩樣本間比較(等級資料的兩樣本比較Wilcoxon檢驗(yàn)),α取0.05。結(jié)果示:RPM干預(yù)4及RPM干預(yù)12周時(shí)各組間番紅O染色比較,A組關(guān)節(jié)軟骨番紅O染色深度強(qiáng)于B組和C組(P<0.05)。B、C兩組間的染色標(biāo)本染色差異無顯著性(P>0.05)。4免疫組化結(jié)果:
7、RPM干預(yù)4周,Ⅱ型膠原軟骨缺損區(qū)陽性表達(dá)共12例,其中A組6例,B組4例,C組2例;RPM干預(yù)12周時(shí),Ⅱ型膠原軟骨缺損區(qū)陽性表達(dá)共16例,其中A組9例,B組5例,C組2例。統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示:RPM干預(yù)4周時(shí),各組間Ⅱ型膠原軟骨缺損區(qū)陽性表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,尚不能認(rèn)為RPM干預(yù)4周時(shí)各組間Ⅱ型膠原軟骨缺損區(qū)陽性表達(dá)有差別。RPM干預(yù)12周時(shí),A組Ⅱ型膠原陽性表達(dá)高于B組和C組(P<0.05),B、C兩組間的染色標(biāo)本例數(shù)差異無顯著性(P>0
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