喘息性疾病患兒人類博卡病毒感染臨床特征分析.pdf

1、目的：
　　 探討重慶地區(qū)下呼吸道感染患兒中人博卡病毒（HBoV）的流行情況、喘息性疾病患兒感染HBoV的臨床特點(diǎn)、呼吸道HBoV病毒載量與患兒臨床表現(xiàn)之間的關(guān)系，以期明確HBoV在下呼吸道感染中是扮演的是病原（pathogen）還是“過客（passenger）”的角色。
　　 方法：
　　 1.從2006年4月～2010年1月，共收集136例喘息性疾病住院患兒的下呼吸道分泌物。同時(shí)，收集了50例同期住院、臨床無

2、喘息表現(xiàn)患兒的下呼吸道分泌物作為對(duì)照。所有標(biāo)本經(jīng)纖維支氣管鏡檢查吸取。
　　 2.利用免疫熒光快速診斷試劑盒篩查標(biāo)本7種常見呼吸道病毒。
　　 3.DNA病毒檢測(cè)：用PCR技術(shù)檢測(cè)標(biāo)本中DNA病毒。標(biāo)本收集后，取200μl用QIAamp（）DNA Mini Kit（QIAGEN Inc，USA）提取病毒基因組DNA，提取的DNA用于病毒基因核酸片斷的擴(kuò)增。
　　 4.RNA病毒檢測(cè)：用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)標(biāo)本中R

3、NA病毒。標(biāo)本收集后，取200μl上清用QIAamp（）RNA Mini Kit（QIAGEN Inc，USA）提取病毒基因組RNA，提取的RNA經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄后用于病毒基因核酸片斷的擴(kuò)增。
　　 5.Realtime-PCR定量檢測(cè)HBoV：使用TaqMan探針法對(duì)HBoV陽(yáng)性標(biāo)本中提取的DNA進(jìn)行HBoV定量檢測(cè)，結(jié)果以copies/ml下呼吸道分泌物表示。
　　 6.統(tǒng)計(jì)分析：計(jì)數(shù)資料的比較使用x2檢驗(yàn)，計(jì)量資料如病毒

4、載量、住院時(shí)間、臨床癥狀評(píng)分之間的比較使用兩組計(jì)量資料的秩和檢驗(yàn)、兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)，組間比較以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)，使用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.一般情況：
　　 2006年4月至2010年1月，共收集標(biāo)本186份。其中對(duì)照組（C組）患兒50例，男性28例，年齡分布為3月～169月，年齡中位數(shù)為16月。喘息組（W組）患兒136例，男性89例，年齡分布為1月～141月

5、，年齡中位數(shù)為10月。
　　 2.下呼吸道病毒檢出情況：
　　 186例中61例患兒下呼吸道分泌物標(biāo)本經(jīng)過呼吸道病原免疫熒光、PCR檢測(cè)，沒有發(fā)現(xiàn)常見呼吸道病毒。186例患兒下呼吸道分泌物標(biāo)本均未檢出PIV-2。
　　 本組資料所有病毒中，檢出率最高的是PIV-3，其次是RSV、HBoV、RV。單一病毒感染的檢出率，仍是這四種病毒居前四位。
　　 31例HBoV陽(yáng)性標(biāo)本中，單純HBoV陽(yáng)性14例，其余17

6、例為混合感染，HBoV混合感染率高達(dá)55％，與HBoV混合感染的常見病毒依次為RSV、RV、PIV-3、ADV。
　　 冬季HBoV檢出率最高，以12月份最為突出，除9月份外，全年各月份均有HBoV感染病例。HBoV感染的患兒年齡分布為4～169月，平均年齡16.41±5.61月（X±SEM）。HBoV感染以6～24月大小的患兒為主。
　　 3.HBoV定量檢測(cè)結(jié)果：
　　 Realtime-PCR定量檢測(cè)HBo

7、V結(jié)果，根據(jù)參考文獻(xiàn)[1]：40個(gè)循環(huán)之前有擴(kuò)增反應(yīng)、病毒載量大于500copies/ml分泌物的標(biāo)本視為特異性、有效擴(kuò)增，HBoV定量>1E4 copies/ml分泌物定義為高病毒載量。對(duì)31例患兒的下呼吸道分泌物標(biāo)本進(jìn)行HBoV定量檢測(cè)，標(biāo)本HBoV定量介于5.02E2～5.26E9 copies/ml分泌物之間。
　　 對(duì)HBoV定量>500copies/ml分泌物的標(biāo)本進(jìn)行分析，其中高載量標(biāo)本10例，占32％，低載量標(biāo)本

8、21例，占68％。對(duì)照組、喘息組HBoV載量平均值分別為4.35E3±1.72E3copies/ml分泌物、2.58E7±1.89E7copies/ml分泌物，中位數(shù)分別為2290.47copies/ml分泌物、13342.83copies/ml分泌物，喘息組標(biāo)本HBoV載量顯著高于對(duì)照組（P=0.01）。
　　 4.喘息性疾病患兒HBoV感染的臨床特點(diǎn)：
　　 高載量組與低載量的呼吸道癥狀評(píng)分無顯著差異（t檢驗(yàn)，P>0

9、.05）。
　　 高載量組平均住院時(shí)間明顯長(zhǎng)于低載量組，二者相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（t檢驗(yàn)，P<0.05）。
　　 高載量組中喘息時(shí)間超過4周的病例數(shù)顯著多于低載量組（x2檢驗(yàn)，P<0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.重慶地區(qū)下呼吸道感染的兒童HBoV感染陽(yáng)性率為17％，HBoV與其它呼吸道常見病毒的混合感染率是55％，與HBoV混合感染的病毒依次是RSV、RV、PIV-3、ADV。
　　 2.HBo