利用反義技術(shù)鑒定肝癌相關(guān)microRNA-224的功能研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的：檢測(cè)肝癌細(xì)胞SMMC-7721與張氏肝細(xì)胞中miRNA-224的表達(dá)情況。針對(duì)肝癌相關(guān)miRNA-224設(shè)計(jì)相應(yīng)的反義寡核苷酸（AMO-miR-224），觀察反義寡核苷酸AMO-miR-224對(duì)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721生物活性的影響，并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行探討。 方法：體外培養(yǎng)肝癌細(xì)胞SMMC-7721與張氏肝細(xì)胞，并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)miRNA-224的表達(dá)情況；臺(tái)盼藍(lán)拒染法篩選出AMO-miR-224作用于SMMC

2、-7721的最佳作用濃度與最佳作用時(shí)間；經(jīng)AMO-miR-224作用后，流式細(xì)胞儀檢測(cè)SMMC-7721細(xì)胞的凋亡情況；實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)細(xì)胞miRNA-224的水平變化。 結(jié)果：肝癌細(xì)胞SMMC-7721中miRNA-224的表達(dá)是張氏肝的9.54倍；濃度為0.3μmol/L的AMO-miR-224作用于SMMC-772148小時(shí)后，能夠抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)，且濃度增加抑制效果更明顯；同樣的條件下，AMO-miR-224也能夠促

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