多能干細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子FoxA2的細(xì)胞特性研究.pdf

1、轉(zhuǎn)錄因子FoxA2是胚胎發(fā)育過程中神經(jīng)產(chǎn)生的重要調(diào)節(jié)因子。研究發(fā)現(xiàn)維甲酸誘導(dǎo)的P19多能性干細(xì)胞定向神經(jīng)分化過程中出現(xiàn)FoxA2的表達(dá)。為了進(jìn)一步探討FoxA2在干細(xì)胞向神經(jīng)分化過程中的作用,我們建立了可以穩(wěn)定表達(dá)GFP-FoxA2融合蛋白的P19細(xì)胞株-P19-GFP-rFoxA2細(xì)胞株。GFP-FoxA2融合蛋白的穩(wěn)定表達(dá)導(dǎo)致P19-GFP-rFoxA2細(xì)胞中多能性相關(guān)基因Nanog和Sox2的表達(dá)降低和堿性磷酸酶的活性降低,但不影

2、響多能性基因Oct4的表達(dá);同時,該細(xì)胞中神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)志物Nestin的表達(dá)以及Prominin-1陽性細(xì)胞數(shù)目的增多,說明FoxA2的穩(wěn)定表達(dá)促使P19細(xì)胞部分喪失干細(xì)胞特征并導(dǎo)致神經(jīng)干細(xì)胞特性的出現(xiàn)。另外,P19-GFP-rFoxA2細(xì)胞中出現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞分化相關(guān)基因NeuroD1的表達(dá)。我們證實了FoxA2可以結(jié)合NeuroD1的啟動子調(diào)節(jié)其活性,說明NeuroD1是FoxA2的下游靶基因。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn):RA誘導(dǎo)P19-GFP-rF